湖羊多胎機(jī)制研究.pdf

1、綿羊的多胎性狀是養(yǎng)羊業(yè)獲得更多經(jīng)濟(jì)效益的重要途徑。近年來在澳大利亞Booroola羊發(fā)現(xiàn)其存在多胎基因(FeeB)，并對其遺傳特點(diǎn)、遺傳效應(yīng)等進(jìn)行了廣泛研究。隨后的幾年內(nèi)，以其為候選基因在不同國家的綿羊品種中進(jìn)行了更為廣泛的發(fā)掘，我國在湖羊和小尾寒羊兩個(gè)品種中都檢測到了該基因，但是多胎基因在維持多胎妊娠方面的生物學(xué)作用、生理生化特點(diǎn)及對激素分泌水平在品種間、品種內(nèi)的關(guān)系和影響一直沒有明確的報(bào)道。為提高綿羊繁殖力，降低多胚移植和多胎綿羊胚

2、胎早期死亡率，很有必要以綿羊子宮內(nèi)環(huán)境為重點(diǎn)從組織學(xué)、生理學(xué)及生殖激素水平進(jìn)行檢測，從而找到多胎綿羊在生殖中的某些規(guī)律，以便為控制綿羊的多產(chǎn)性狀奠定理論依據(jù)。 本研究應(yīng)用放射免疫測定、核酸分析、基因標(biāo)記等技術(shù)，主要對湖羊多胎性狀進(jìn)行深入研究，同時(shí)以中國美利奴新疆軍墾型細(xì)毛羊?yàn)閷φ者M(jìn)行研究，從理論上充實(shí)綿羊繁殖妊娠生理機(jī)制，對提高綿羊產(chǎn)羔率、減少胚胎死亡和提高養(yǎng)羊業(yè)經(jīng)濟(jì)效益有重要意義。主要內(nèi)容如下： 1 綿羊妊娠早期的激素

3、分泌水平 以研究江蘇湖羊多胎機(jī)制為目的，應(yīng)用放射免疫測定、核酸分析、基因標(biāo)記等分析技術(shù)，并以中國美利奴新疆軍墾型單胎母羊?yàn)閷φ?，通過分析比較母羊的發(fā)情周期和妊娠早期外周血中促卵泡素(FSH)、瘦素(I~eptin)、前列腺素F<,2α>(PGF<,2α>)、孕酮(P<,4>)和17β-雌二醇(E<,2>)水平、胎盤子葉DNA和RNA及葡萄糖含量來分析比較多胎湖羊與單胎中國美利奴新疆軍墾型母羊的差別，結(jié)果表明：兩者之間17β-雌二

4、醇(E<,2>)峰值與發(fā)情持續(xù)期相關(guān)差異不顯著(P>0.05)。而外周血中孕酮(P<,4>)、雌二醇(E<,2>)和前列腺素(PG)濃度的平均谷值和促卵泡素(FSH)、促黃體素(LH)的峰值差異水平分別達(dá)到極顯著(P<0.01)和顯著水平(P<0.05)；瘦素水平均值差異達(dá)到極顯著水平(P<0.01)。因此，推測瘦素水平含量的不同直接影響綿羊是否懷孕以及單或雙胎，或是因綿羊懷孕因單胎或雙胎不同而使瘦素水平含量升高。 2 綿羊妊娠

5、早期子宮內(nèi)環(huán)境研究 采用解剖學(xué)方法和生化方法研究綿羊妊娠早期的胎兒重量、體長和母體的卵巢重 量、子葉數(shù)量和DNA含量的差異，結(jié)果表明：胎兒重量差異顯著(P<0.05)，胎兒長度 差異不顯著(p>0.05)，卵巢重量左右差異不顯著(p>0.05)，子宮子葉大與斗-+-+大和小與小之間差異不顯著(p>0.05)，子葉面積差異顯著(p

6、的不同。子宮滋養(yǎng)層DNA和RNA含量有顯著的差異(p

7、。綿羊BMPR-IB基因是控制Booroola綿羊多胎性狀的主效基因，本研究目的在于建立一種對BMPR-IB基因四引物ARMS PCR檢測方法。根據(jù)四引物ARMSPCR技術(shù)原理，在綿羊BMPR-IB基因(GenBankAF370007)突變位點(diǎn)(A746G)設(shè)計(jì)一對特異性引物，并在突變點(diǎn)兩側(cè)設(shè)計(jì)一對參照引物，用來擴(kuò)增含有突變點(diǎn)的DNA片段，可在一步PCR反應(yīng)中根據(jù)電泳圖譜準(zhǔn)確判斷綿羊個(gè)體的BMPR-IB基因型，對比PCR-RFLP檢測結(jié)