Scu對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及對(duì)PARP-AIF介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑的抑制研究.pdf

1、腦血管意外是一種常見(jiàn)疾病。根據(jù)發(fā)病原因的不同，可分為缺血性和出血性腦血管意外兩大類。前者發(fā)病率遠(yuǎn)較后者為高，尤以65歲以下的老年人多見(jiàn)。腦血管意外具有高死亡率和高致殘率的特點(diǎn)。據(jù)世界衛(wèi)生組織調(diào)查表明，腦血管意外引起的死亡率占所調(diào)查的57個(gè)國(guó)家死亡總?cè)藬?shù)的11.3％，僅次于癌癥和心肌梗死。腦血管意外的患者約有1/3在發(fā)病后不久死亡，幸存者則由于偏癱、失語(yǔ)等后遺癥而致殘，喪失工作能力，甚至喪失生活自理能力。隨著人口老齡化程度的加劇，腦血管疾

2、病已成為一個(gè)倍受社會(huì)關(guān)注的問(wèn)題。腦缺血是腦血管病最主要的病種。在我國(guó)，其死亡率僅次于惡性腫瘤，嚴(yán)重危害人類健康。大量文獻(xiàn)報(bào)道，伴隨著腦神經(jīng)細(xì)胞缺血，機(jī)體的應(yīng)急保護(hù)和缺血導(dǎo)致的損傷機(jī)制同時(shí)被激活，相關(guān)的細(xì)胞因子表達(dá)增高，信號(hào)通路被激活，最終導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞凋亡或壞死。因此，探尋缺血性腦血管疾病的有效治療策略一直是世界醫(yī)藥學(xué)界共同關(guān)注的重大課題之一。 燈盞花具有抗腦缺血、抗心肌缺血等藥理作用。臨床主要用于治療心肌缺血損傷及腦血栓等引起的

3、心腦血管疾病。燈盞花素是從燈盞花中提取的主要有效部位，是燈盞花甲素和燈盞花乙素(Scu)的混合物。其中Scu(黃芩素苷，scutellarin)，即4，5，6-三羥基黃酮-7-葡糖醛酸苷，是燈盞花抗腦缺血損傷的主要有效成分。本研究采用大鼠局灶性腦缺血再灌注模型，旨在研究Scu對(duì)大鼠腦缺血再灌注過(guò)程中多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)/凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)介導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡途徑的影響，為其在臨床上防治腦血管疾病提供理論基礎(chǔ)。 第

4、一部分燈盞花乙素(Scu)對(duì)大鼠腦缺血再灌注腦損傷的保護(hù)作用采用大腦中動(dòng)脈阻斷(middle cerebral artery occulusion，MCAO)局灶性腦缺血再灌注模型，缺血前1 h給予Scu25，50，75 mg·kg-1 7 d，ig。末次給藥1 h后制備MCAO模型，缺血2 h，再灌注22 h后，分別用Longa’s法、TIC染色法及干燥失重法來(lái)評(píng)價(jià)大鼠的神經(jīng)功能狀態(tài)及腦梗塞面積；用HE染色評(píng)價(jià)腦細(xì)胞損傷的程度。HE染

5、色顯示：模型組大鼠腦缺血再灌注后大鼠皮層和紋狀體細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞間空隙增寬，組織結(jié)構(gòu)略顯疏松，細(xì)胞形態(tài)異常，形狀不規(guī)則，胞體縮小，胞質(zhì)凝集，胞核固縮濃染，呈致密濃染塊狀或顆粒狀，有的細(xì)胞界限不清，結(jié)構(gòu)消失，并可見(jiàn)嗜神經(jīng)現(xiàn)象；給予Scu50，75 mg·kg-1可明顯減少M(fèi)CAO后腦梗塞面積，改善神經(jīng)功能癥狀，HE染色陽(yáng)性染色細(xì)胞明顯減少，與模型組比較，具有顯著性差異(P＜0.05)。 第二部分 Scu對(duì)大鼠腦缺血再灌注腦損傷所

6、致神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響大鼠在造模(MCAO)前1h給予7 d的Scu，ig。腦缺血2h再灌注22h后，用TUNEL法評(píng)價(jià)腦細(xì)胞凋亡的程度；用Western blot檢測(cè)AIF蛋白在線粒體及細(xì)胞核中的表達(dá)水平，同時(shí)檢測(cè)腦組織中NAD和PARP酶的活性。結(jié)果表明：模型組大鼠腦缺血再灌注后TUNEL陽(yáng)性染色細(xì)胞明顯增多(P＜0.05，與偽手術(shù)組比較)，腦組織中NAD水平明顯降低，PARP酶過(guò)度活化，AIF在細(xì)胞核的表達(dá)明顯增加。給予Scu(50