替米沙坦對晚期糖基化終末產(chǎn)物誘導(dǎo)人血管內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響及與PPAR-γ的關(guān)系.pdf

1、目的：探討替米沙坦對晚期糖基化終末產(chǎn)物誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響及與過氧化物酶體增殖物激活受體-γ(PPAR-γ)的關(guān)系。
　　 方法：膠原酶消化法體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)。實(shí)驗(yàn)分8組：牛血清白蛋白(BSA)組：以100μg/ml BSA刺激細(xì)胞24h；AGEs組：以100μg/mlAGEs刺激細(xì)胞24h；以替米沙坦刺激細(xì)胞30min，再加AGEs刺激24h，依據(jù)替米沙坦?jié)舛炔煌来螢樘婷咨程?組(1nm

2、ol/L)；替米沙坦2組(10 nmol/L)；替米沙坦3組(100 nmol/L)；替米沙坦4組(1000 nmol/L)；GW9662組：先加入5000nmol/L GW9662(PPAR-γ抑制劑)刺激細(xì)胞30min，再加入1000 nmol/L替米沙坦和100μg/ml AGEs刺激24h;15d-PGJ2組：以10μ mol/L15d-PGJ2(PPAR-γ激動(dòng)劑)刺激細(xì)胞30min，再加100μ g/ml AGEs刺激24h

3、。采用RT-PCR法檢測PPAR-γ、AGEs受體(RAGE)和單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)mRNA的表達(dá)；熒光探針2，7-二氯二氫熒光素乙酰乙酸檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的變化。
　　 結(jié)果：替米沙坦呈濃度依賴性抑制AGEs誘導(dǎo)的HUVECs MCP-1 mRNA的表達(dá)，替米沙坦?jié)舛葹?0nM時(shí)，MCP-1 mRNA表達(dá)即明顯降低(0.963±0.061 vs1.211±0.039，P＜0.01)。與AGEs組比較，替米

4、沙坦4組PPAR-γ mRNA表達(dá)水平明顯升高(0.690±0.170 vs0.232±0.085，P＜0.05)，RAGE mRNA和MCP-1 mRNA表達(dá)水平明顯下調(diào)(RAGE mRNA：0.385±0.005 vs0.933±0.039，P＜0.01；MCP-1 mRNA：0.590±0.071 vs1.500±0.160，P＜0.01)，ROS熒光信號強(qiáng)度明顯減弱。與AGEs組比較，15d-PGJ2組PPAR-γ mRNA水平

5、明顯升高(0.875±0.112 vs0.232±0.085，P＜0.01)，RAGE mRNA和MCP-1mRNA的表達(dá)水平明顯降低(RAGE mRNA：0.280±0.020 vs0.933±0.039，P＜0.01；MCP-1 mRNA：0.386±0.088 vs1.500±0.160，P＜0.01)，ROS熒光信號強(qiáng)度明顯減弱。與替米沙坦4組比較，GW9662組PPAR-γ mRNA的表達(dá)水平明顯降低(0.294±0.020

6、vs0.690±0.170，P＜0.05)，RAGEmRNA和MCP-1mRNA的表達(dá)水平明顯升高(RAGE mRNA：0.765±0.032 vs0.385±0.005，P＜0.01；MCP-1 mRNA：1.185±0.175 vs0.590±0.071，P＜0.01)，ROS熒光信號強(qiáng)度明顯增強(qiáng)。
　　 結(jié)論：⑴AGEs可明顯促進(jìn)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞RAGE mRNA、MCP-1 mRNA和ROS的表達(dá)；⑵替米沙坦可明顯抑制A