肺鱗癌及其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、肺癌是當(dāng)今全世界發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤之一。每年全球大約有120萬新發(fā)肺癌病例，占所有新發(fā)惡性腫瘤病例的15％，而其死亡人數(shù)占到惡性腫瘤死亡數(shù)的30％。盡管有關(guān)肺癌的研究不斷取得進展，但肺癌的治療效果至今難以令人滿意。目前，肺癌的總體5年生存率為15％，在我國則低于10％。開發(fā)更加敏感的早期診斷方法和更加有效的治療靶點是提高肺癌診治水平的重要發(fā)展方向。利用分子生物學(xué)手段篩選肺癌發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移過程中的特異性表達蛋白，可以揭示腫瘤相

2、關(guān)分子機制、開發(fā)診斷和治療的新靶點。
　　 蛋白質(zhì)組學(xué)作為全面分析蛋白質(zhì)表達變化的有力研究工具，已廣泛應(yīng)用到疾病特別是腫瘤研究之中。2D-DIGE的出現(xiàn)是蛋白質(zhì)組學(xué)的一個重要進展。它可以對生物樣品之間的蛋白質(zhì)差異表達值提供準(zhǔn)確和重復(fù)性好的分析。本研究運用2D-DIGE系統(tǒng)分析了12對肺鱗癌(其中6例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，6例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)癌組織和相應(yīng)癌旁組織的差異表達蛋白，并利用MALDI-TOF/TOF質(zhì)譜對部分差異表達蛋白進行了鑒定

3、。
　　 將肺鱗癌組織與相應(yīng)癌旁組織進行差異分析，得到66個癌組織中顯著上調(diào)(Ratio癌/癌旁≥2，p≤0.01)蛋白位點和99個顯著下調(diào)(Ratio癌/癌旁≤-2，p≤0.01)蛋白位點。通過切膠回收和質(zhì)譜分析，在這165個差異表達位點中鑒定出了22種腫瘤高表達蛋白和19種低表達蛋白。將有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織進行差異分析，得到24個在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺鱗癌組織中顯著上調(diào)(Ratio有轉(zhuǎn)移癌/無轉(zhuǎn)移癌≥1.5，p≤

4、0，05)蛋白位點和20個顯著下調(diào)(Ratio有轉(zhuǎn)移癌/無轉(zhuǎn)移癌≤-1.5，p≤0.05)蛋白位點。通過切膠回收和質(zhì)譜分析，在這44個差異表達位點中鑒定出了8種淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)高表達蛋白和9種低表達蛋白。通過Swiss-prot蛋白庫的注釋信息對得到鑒定的41種腫瘤發(fā)生相關(guān)的蛋白和17種淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的功能進行總結(jié)，提示它們分別參與調(diào)節(jié)細胞骨架形成、糖代謝、氧化還原、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運、基因轉(zhuǎn)錄、mRNA加工等多項細胞生理活動。通過對這些差異