兔VX2種植性肝癌模型不同生長期的MR擴(kuò)散加權(quán)成像及與病理對照研究.pdf

1、目的：建立實(shí)驗(yàn)性兔VX2種植性肝癌模型，行不同時(shí)間點(diǎn)不同b值下的腫瘤MR擴(kuò)散加權(quán)成像(DWI)檢查，從中篩選出合適的b值；比較不同時(shí)間點(diǎn)腫瘤DWI檢查結(jié)果的差異及其病理基礎(chǔ)，以初步探討DWI檢查對監(jiān)測兔VX2種植性肝癌模型生長特點(diǎn)的價(jià)值；比較不同時(shí)間點(diǎn)腫瘤實(shí)性部分ADC值和eADC值的差異及其演變規(guī)律，分析不同時(shí)間點(diǎn)兔VX2種植性肝癌模型的腫瘤實(shí)性部分ADC值、eADC值與其細(xì)胞密度和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)指數(shù)的相關(guān)性，進(jìn)一步探討不

2、同時(shí)間點(diǎn)腫瘤實(shí)性部分ADC、eADC值差異的病理基礎(chǔ)。 材料與方法：新西蘭實(shí)驗(yàn)兔44只，采用開腹直視下腫瘤組織塊穿刺接種法建立兔VX2種植性肝癌模型，每只實(shí)驗(yàn)兔只接種一個(gè)部位，均種植在肝左葉，成功建立模型38只。將實(shí)驗(yàn)兔隨機(jī)分為兩組，每組19只，分別于接種后第14天和22天行磁共振檢查，使用美國GE公司生產(chǎn)的1.5TTwinSpeedInfinitywithExciteII超導(dǎo)型磁共振成像系統(tǒng)，應(yīng)用3英寸表面線圈，先行常規(guī)T1W

3、I和T2WI檢查，DWI檢查采用單次激發(fā)SE-EPI序列，同時(shí)在X、Y、Z軸三個(gè)方向上施加敏感梯度脈沖，取0、200s/mm2，0、400s/mm2，0、600s/mm2，0、800s/mm2和0、1000s/mm2五組b值，得到各b值下不同時(shí)間點(diǎn)兔VX2種植性肝癌模型腫瘤的DWI圖像及工作站處理后的ADC圖和eADC圖，并分別測量各b值組的不同時(shí)間點(diǎn)腫瘤實(shí)性部分的ADC值及eADC值。MRI檢查完畢后獲取全部實(shí)驗(yàn)兔肝臟標(biāo)本并按掃描方向

4、切層，行常規(guī)HE染色和免疫組織化學(xué)PCNA染色。采用CMIAS多功能真彩色病理圖像分析系統(tǒng)，細(xì)胞密度的計(jì)數(shù)方法是計(jì)算每個(gè)采集野內(nèi)腫瘤細(xì)胞核總面積與細(xì)胞核外其余部分(包括腫瘤細(xì)胞胞漿、細(xì)胞外間隙)的面積比值，兼顧腫瘤組織細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞外空間分布的總體致密程度，取5個(gè)視野的平均值作為腫瘤的細(xì)胞密度，以百分比表示；PCNA染色采用單克隆抗體二步法標(biāo)記細(xì)胞核，選擇PCNA染色陽性細(xì)胞分布最密集的區(qū)域，采集并計(jì)數(shù)PCNA染色陽性細(xì)胞數(shù)和腫瘤細(xì)胞總數(shù)

5、，計(jì)算腫瘤PCNA指數(shù)(PCNA陽性細(xì)胞/月中瘤細(xì)胞總數(shù))，取5個(gè)視野的平均值作為腫瘤的PCNA指數(shù)，以百分比表示。分析指標(biāo)包括：①觀察不同時(shí)間點(diǎn)VX2種植性肝癌模型腫瘤的體積變化、倍增時(shí)間以及T1WI、T2WI和DWI圖像的信號特點(diǎn)；②分析不同b值組DWI圖像的腫瘤.肝實(shí)質(zhì)信號強(qiáng)度比(SIR)、信噪比(SNR)和腫瘤.肝實(shí)質(zhì)對比噪聲比(CNR)，評價(jià)DWI圖像質(zhì)量，選取最佳b值；③重點(diǎn)觀察和分析不同時(shí)間點(diǎn)腫瘤DWI圖、ADC圖和eAD

6、C圖的表現(xiàn)及其差異；并與大體病理進(jìn)行對照；④進(jìn)一步分析和比較不同時(shí)間點(diǎn)腫瘤實(shí)性部分ADC值和eADC值的差異及其演變規(guī)律；⑤重點(diǎn)分析不同時(shí)間點(diǎn)兔VX2種植性肝癌模型實(shí)性部分ADC值、eADC值與腫瘤細(xì)胞密度及PCNA指數(shù)之間的相關(guān)性。 結(jié)果：①采用開腹直視下腫瘤組織塊穿刺接種法建立兔VX2種植性肝癌模型的成功率為86％(38/44)，均于肝左葉形成孤立性腫瘤，22天組與14天組比較，腫瘤體積增大明顯，前者平均體積約為0.32cm

7、3，后者平均體積約為1.76cm3，倍增時(shí)間為3.2天；②所有腫瘤在MRT1WI呈稍低信號，在T2WI上呈稍高信號，邊界清楚，22天組中有4個(gè)腫瘤中心可見斑片狀長T2信號；③不同b值組所有腫瘤在DWI圖像上均呈明顯高信號，并與周圍肝實(shí)質(zhì)形成鮮明對比；④隨b值的升高，DWI圖像SIR逐漸增加，SNR和CNR逐漸下降，然而當(dāng)b值為1000s/mm2時(shí)仍可清楚分辨腫瘤，并可進(jìn)行實(shí)性部分ADC值和eADC值測量；⑤14天組所有腫瘤的ADC圖、e

8、ADC圖信號均勻，大體病理顯示所有腫瘤質(zhì)地均勻，無壞死囊變區(qū)，與ADC圖和eADC圖表現(xiàn)一致；22天組所有腫瘤中心部分在ADC圖、eADC圖上均可見斑片狀壞死囊變區(qū)的信號，且與大體病理所顯示的壞死囊變區(qū)范圍基本一致，而在常規(guī)T2WI上僅有4例腫瘤中心可見斑片狀高信號：⑥同一時(shí)間點(diǎn)不同b值組腫瘤實(shí)性部分ADC值隨b值增大而下降，eADC值隨b增大而升高；⑦在各b值組22天組兔VX2種植性肝癌模型的腫瘤實(shí)性部分ADC值均較14天組下降，eA

9、DC值均較14天組升高，而細(xì)胞密度和PCNA指數(shù)較14天組上升。兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)腫瘤實(shí)性部分的ADC值與其細(xì)胞密度、PCNA指數(shù)呈負(fù)相關(guān)，(r=-0.695，p=0.000；r=-0.698，p=0.000)；而eADC值則與其細(xì)胞密度、PCNA指數(shù)呈正相關(guān)，且以b值取0、1000s/mm2時(shí)相關(guān)性最強(qiáng)(r=0.673，p=0.000；r=0.682，p=0.000)。 結(jié)論：①采用開腹直視下腫瘤組織塊穿刺接種法建立兔VX2種植性肝癌

10、模型成功率較高，該模型具有容易復(fù)制，生長迅速，較易出現(xiàn)壞死囊變等特點(diǎn)；②在兔VX2種植性肝癌模型的DWI成像參數(shù)中以選擇b值為1000s/mm2比較合適；③MRDWI檢查的ADC圖和eADC圖能早期檢出兔VX2種植肝癌模型腫瘤的壞死囊變區(qū)，在動(dòng)態(tài)追蹤腫瘤發(fā)生、發(fā)展和生長特性方面具有重要的價(jià)值，是常規(guī)MR檢查的有益補(bǔ)充；④隨著腫瘤種植時(shí)間的延長，腫瘤實(shí)性部分ADC值減低，eADC值升高，具有一定的規(guī)律性；⑤在影響兔VX2種植性肝癌模型腫瘤