非淀粉多糖酶在奧尼羅非魚(yú)飼料中的應(yīng)用及其作用機(jī)理的研究.pdf

1、本課題研究了在飼料中添加非淀粉多糖酶對(duì)羅非魚(yú)和鯉魚(yú)的生長(zhǎng)性能和消化率的影響及對(duì)羅非魚(yú)消化酶、免疫等作用的機(jī)理。 試驗(yàn)一：研究了羅非魚(yú)餌料中噴涂液體非淀粉多糖酶在水中穩(wěn)定性。結(jié)果表明，添加了復(fù)合酶的飼料在投放入水中1小時(shí)之內(nèi)，依然能保持較高酶活性，說(shuō)明該酶制劑在水中的穩(wěn)定性較好，為非淀粉多糖酶在水產(chǎn)動(dòng)物中的應(yīng)用提供了很好的前提。 試驗(yàn)二：研究了添加非淀粉多糖酶對(duì)奧尼羅非魚(yú)飼料養(yǎng)分消化率、血液生化及免疫功能的影響。試驗(yàn)選用體

2、重約60克的奧尼羅非魚(yú)(Oreochromisniloticus×O.aureus)560尾，隨機(jī)分成4個(gè)處理組，每組7個(gè)重復(fù)，每重復(fù)20尾奧尼羅非魚(yú)，分別添加不同梯度水平的液體酶制劑(0、0.01％、0.02％、0.04％)。結(jié)果表明：1.奧尼羅非魚(yú)飼料中添加非淀粉多糖酶對(duì)羅非魚(yú)的特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)等生產(chǎn)性能均有顯著影響(P＜0.05)；2.添加復(fù)合酶制劑顯著提高了奧尼羅非魚(yú)的干物質(zhì)、粗蛋白、能量和某些氨基酸的消化率(P＜0.05)

3、；3.添加復(fù)合酶制劑能顯著提高奧尼羅非魚(yú)魚(yú)體成分中的粗蛋白質(zhì)含量(P＜0.05)，0.04％組顯著降低了粗灰分、鈣、磷的含量(P＜0.05)；4.奧尼羅非魚(yú)飼料中添加非淀粉多糖酶提高了血清總蛋白的含量，但差異不顯著(P＞0.05)；顯著降低了血清中甘油三酯、血糖和血清尿素氮的含量(P＜0.05)；顯著提高了血液中T3和T4的含量，而胰島素的含量變化沒(méi)有規(guī)律。 試驗(yàn)三：研究了不同溫度和pH值對(duì)奧尼羅非魚(yú)蛋白酶和淀粉酶活性的影響。結(jié)

4、果表明，奧尼羅非魚(yú)肝臟蛋白酶活性在相同測(cè)定條件下遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于腸道蛋白酶活性。蛋白酶的最適溫度均為55℃，最適pH均為8.0。隨溫度變化淀粉酶活性變化不大，在40℃時(shí)，淀粉酶活性最高。在pH5.8-6.2范圍內(nèi)，淀粉酶活性最高。 試驗(yàn)四：研究了非淀粉多糖酶對(duì)羅非魚(yú)蛋白酶、淀粉酶活性影響的研究。本研究于喂料前、喂料后1、3、5小時(shí)四個(gè)時(shí)間點(diǎn)，分別對(duì)非淀粉多糖酶不同添加量各組進(jìn)行組織采樣，綜合研究了添加非淀粉多糖酶對(duì)羅非魚(yú)肝臟、腸道(前、

5、中后腸)蛋白酶和淀粉酶的影響。結(jié)果顯示：1.蛋白酶活性分別按肝胰臟、胃、腸道依次升高；2.添加0.04％非淀粉多糖酶組羅非魚(yú)肝胰臟、胃蛋白酶活性最大，均顯著高于對(duì)照組；3.添加非淀粉多糖酶對(duì)前腸蛋白酶影響規(guī)律不一致，但總體以添加0.01％非淀粉多糖酶組最高；4.除喂后5小時(shí)采樣結(jié)果外，其它時(shí)間采樣檢測(cè)結(jié)果均以添加0.01％非淀粉多糖酶組中后腸蛋白酶活性最高，顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)；5.適量添加非淀粉多糖酶對(duì)肝臟淀粉酶活性影響不大

6、，高量添加非淀粉多糖酶(0.04％)對(duì)肝胰臟淀粉酶活性具有抑制作用；添加非淀粉多糖酶一定程度上提高了前、中后腸淀粉酶活性。 試驗(yàn)五：研究了非淀粉多糖酶對(duì)羅非魚(yú)肝胰臟淀粉酶活性和α-淀粉酶基因表達(dá)的影響，并克隆得到了羅非魚(yú)α-淀粉酶的cDNA部分序列。研究與分析了添加不同水平的非淀粉多糖酶(0、0.01％、0.02％、0.04％)對(duì)羅非魚(yú)在喂料前和喂料后5h的肝胰臟淀粉酶活性和α-淀粉酶的基因表達(dá)。結(jié)果顯示，喂料前和喂料后5h分別

7、取樣檢測(cè)，0.04％的酶添加量組的淀粉酶活性和α-淀粉酶mRNA表達(dá)量均顯著低于其他三組(P＜0.01)。從淀粉酶活性和基因表達(dá)分析都表明，適量添加非淀粉多糖酶時(shí)，羅非魚(yú)肝胰臟淀粉酶活性和基因表達(dá)都變化不大，而當(dāng)添加量較高時(shí)(0.04％)將抑制其表達(dá)。這說(shuō)明如外源添加NSP酶過(guò)高，有可能抑制機(jī)體自身肝胰臟淀粉酶的分泌。 試驗(yàn)六：研究了非淀粉多糖酶對(duì)奧尼羅非魚(yú)飼養(yǎng)水質(zhì)的影響。結(jié)果表明，羅非魚(yú)飼料中添加非淀粉多糖酶改善了養(yǎng)殖水體的p

8、H值，顯著降低了水中氨氮的含量，提高了水中的溶氧量。 綜上所述，飼料中添加非淀粉多糖酶可以顯著提高羅非魚(yú)和鯉魚(yú)的生產(chǎn)性能及飼料養(yǎng)分的消化率，影響了羅非魚(yú)魚(yú)體成分中蛋白質(zhì)、灰分、鈣和磷的含量，提高了羅非魚(yú)的飼養(yǎng)水質(zhì)，影響了血液生化指標(biāo)和某些代謝激素的水平。添加非淀粉多糖酶提高了肝胰臟和胃中的蛋白酶活性，提高了前、中后腸的淀粉酶活性。適量的非淀粉多糖酶對(duì)羅非魚(yú)肝胰臟淀粉酶活性和基因表達(dá)的影響不大，高劑量非淀粉多糖酶則抑制了肝胰臟淀粉