澤瀉防治泌尿系結石有效部位工藝及藥理學研究.pdf

1、目的：在前期國家自然科學基金（No: 39970891）研究的基礎上，初步確定澤瀉防治泌尿系結石有效部位為提取物中的總三萜成分。本文應用大孔吸附樹脂分離純化澤瀉藥材中的三萜類化學成分，使其含量達到50％以上，其標示量成分23-乙酰澤瀉醇B含量達到1.29％以上，并通過藥效學實驗進一步確證該有效部位為防治泌尿系結石的活性部位。 方法與結果： 1.建立了澤瀉有效部位中總三萜的含量測定方法。以藥材中含量最高的三萜類23-乙酰澤

2、瀉醇B為對照品，用5％香草醛-冰醋酸溶液，高氯酸顯色，在554nm波長處測定樣品吸收度。實驗表明23-乙酰澤瀉醇B在23.80～142.8ug線性范圍內(nèi)，線性關系良好，其回歸方程為Y=0.0055x-0.0512，r=0.9996。該方法操作簡便，結果穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，可作為澤瀉藥材質(zhì)量監(jiān)控的有效手段。 2.建立了澤瀉有效部位中23-乙酰澤瀉醇B的HPLC-ELSD含量測定方法。以23-乙酰澤瀉醇B為對照品，應用HPLC-ELSD

3、對澤瀉有效部位中23-乙酰澤瀉醇B的含量測定進行了方法學考察。結果表明在23-乙酰澤瀉醇B進樣量在0.1384ug～0.6920ug之間時線性關系良好，其回歸方程為：Y=494467X-4426.9,r=0.9999。加樣回收率為99.97％,RSD為2.680％。精密度、重復性、穩(wěn)定性實驗也均符合要求。 3.建立了澤瀉防治泌尿系結石有效部位的制備方法。首先優(yōu)化了澤瀉有效部位的提取工藝，以23-乙酰澤瀉醇B含量為指標對提取工藝進

4、行優(yōu)化，經(jīng)正交實驗考察，確定最佳提取工藝為：70％乙醇、用量為10倍量、提取3次、每次1.5h。繼而對大孔吸附樹脂分離富集有效部位的工藝進行了篩選及優(yōu)化。澤瀉浸膏用一定量50％乙醇溶解后，上樣于D型大孔吸附樹脂，充分吸附后，再用一定量蒸餾水，30％乙醇，90％乙醇依次洗脫，收集90％乙醇洗脫液，蒸干溶劑，干燥，即為所得。以23-乙酰澤瀉醇B為對照品計算，富集產(chǎn)物中總三萜類含量可達50％以上，23-乙酰澤瀉醇B含量可達1.290％以上。實

5、驗表明：D型大孔吸附樹脂適合分離純化澤瀉中極性較小的三萜類成分。 4.探討中藥澤瀉總三萜有效部位在體外對草酸鈣結晶形成的影響，并初步確定其抑制草酸鈣結石形成的有效部位。應用種晶技術檢測澤瀉不同濃度的總三萜提取物在體外對一水草酸鈣晶體生長指數(shù)（I.I）。結果表明澤瀉總三萜浸膏高、低劑量組的草酸鈣晶體生長抑制指數(shù)高達87.75％。中藥澤瀉總三萜提取物能明顯抑制草酸鈣晶體的生長，是澤瀉抑制草酸鈣結石形成的有效部位，對該部位的有效化學活