版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領
文檔簡介
1、惡性膠質(zhì)瘤是最為常見的原發(fā)性腦瘤,因其具有極強的浸潤和擴散能力,常用的醫(yī)療手段很難將其治愈,近年來研究發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)具有自我更新和趨向膠質(zhì)瘤遷移的能力,成為治療此類疾病的種子細胞。為了達到理想的治療效果,必須保證移植的MSCs能夠定向遷移到病灶或受損部位,因此研究調(diào)控MSCs定向遷移的機制成為熱點之一。大量文獻報道多種細胞因子(PDGF、IGF、EGF和Ang-
2、1等)和信號通路(PI3K/Akt、MAPK/ERK1/2、JAK/STAT、Rho和TGF-β/Smad等)參與調(diào)控MSCs的定向遷移,在hMSCs中Wnt3a能夠通過激活Wnt/β-catenin信號通路促進細胞的遷移,而在小鼠肝細胞中HGF也能通過c-met上調(diào)細胞核內(nèi)β-catenin的累積促進細胞趨化性遷移,目前關(guān)于HGF和Wnt/β-catenin信號通路協(xié)同調(diào)控MSCs遷移的作用鮮有報道。本文旨在研究β-catenin在H
3、GF誘導MSCs趨化性遷移的過程中的作用。
本研究采用Percoll密度梯度離心法從大鼠骨髓中成功分離、培養(yǎng)并擴增得到高純度的MSCs。提取MSCs的總RNA,RT-PCR克隆得到SD大鼠β-catenin及其激活型ΔN90的cDNA,利用AdEasyTM系統(tǒng)構(gòu)建重組腺病毒載體Ad-β-catenin和Ad-ΔN90,構(gòu)建成功的重組腺病毒在QBI-293A細胞中包裝并擴增,獲得高滴度的病毒子,感染細胞以獲得高表達β-caten
4、in的MSCs。同時針對SD大鼠β-catenin基因由Abgent公司設計并合成FAM熒光標記的siRNA(FAM-siRNA),用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染MSCs降低β-catenin的表達。為進一步檢測β-catenin在MSCs定向遷移過程中的作用提供有利的工具。
首先研究β-catenin對MSCs遷移的影響,利用Boyden chamber研究發(fā)現(xiàn)β-catenin的抑制劑FH535上調(diào)β-catenin的磷酸化使其降解,顯著性
5、的抑制MSCs的遷移。β-catenin激活劑LiCl通過上調(diào)β-catenin促進的MSCs遷移呈濃度依賴效應,當LiCl濃度為10mM時,MSCs達到最大的遷移數(shù)量,而50ng/ml的Wnt3a也能促進MSCs的遷移。Duun chamber和劃痕實驗也證實了這些結(jié)果。免疫熒光染色結(jié)果顯示LiCl和Wnt3a能夠促進β-catenin的入核,而FH535能夠抑制此種效應。以上說明β-catenin參與調(diào)控MSCs的遷移。
6、在探討β-catenin調(diào)控MSCs趨向HGF定向遷移的實驗中,Boyden chamber和Dunn chamber裝置研究發(fā)現(xiàn)FH535和低表達β-catenin(si-β-catenin)抑制MSCs趨向HGF的定向遷移,而LiCl、Wnt3a和過表達β-catenin都能夠促進MSCs的遷移并增強HGF對MSCs的趨化效應。Western blot發(fā)現(xiàn)HGF能促進β-catenin和ABC蛋白水平的增加并抑制其磷酸化,同時HGF
7、促進了β-catenin的入核,而FH535能抑制這種效應。說明β-catenin參與調(diào)控MSCs趨向HGF的定向遷移。
綜上,β-catenin能被LiCl和Wnt3a上調(diào),從而促進MSCs遷移,而FH535促使β-catenin降解,抑制LiCl和Wnt3a對MSCs遷移的作用。β-catenin的上調(diào)也能夠促進HGF誘導的MSCs定向遷移,而抑制β-catenin的表達則降低了MSCs向HGF定向遷移的能力。本研究為進一
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- Dvl調(diào)控間充質(zhì)干細胞向HGF的定向遷移.pdf
- TCF4-β-catenin調(diào)控間充質(zhì)干細胞向HGF的趨化性遷移.pdf
- miR-124對間充質(zhì)干細胞定向遷移的調(diào)控研究.pdf
- 粘著斑參與調(diào)節(jié)成神經(jīng)分化的間充質(zhì)干細胞向VEGF的定向遷移.pdf
- VEGF誘導成神經(jīng)分化的間充質(zhì)干細胞定向遷移研究.pdf
- 骨髓間充質(zhì)干細胞向膠質(zhì)瘤遷移的機制研究.pdf
- 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向甲狀旁腺細胞定向分化的體外研究.pdf
- 骨橋蛋白對骨髓間充質(zhì)干細胞定向遷移的影響及其分子機理.pdf
- 缺氧對骨髓間充質(zhì)干細胞骨向分化調(diào)控的體外研究.pdf
- FGF4、HGF通過MAPK通路啟動骨髓間充質(zhì)干細胞向肝細胞分化的驗證.pdf
- 骨髓間充質(zhì)干細胞與脂肪間充質(zhì)干細胞向類纖維環(huán)細胞分化效應的比較研究.pdf
- 成神經(jīng)分化的骨髓間充質(zhì)干細胞向干細胞因子的趨化性遷移研究.pdf
- 膜電位調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)細胞分化的初步研究.pdf
- HGF刺激的間充質(zhì)干細胞中β-catenin信號與PI3K-Akt、MAPKs信號的關(guān)系.pdf
- 人嗅黏膜間充質(zhì)干細胞向血管內(nèi)皮細胞定向分化的研究.pdf
- 骨髓間充質(zhì)干細胞定向誘導分化的實驗研究.pdf
- 骨髓間充質(zhì)干細胞的定向與共培養(yǎng)體系誘導.pdf
- 紅景天苷通過Wnt-β-catenin信號通路影響小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)元細胞定向分化.pdf
- 骨髓間充質(zhì)干細胞在成神經(jīng)分化過程中的定向遷移研究.pdf
- VEGF-C聯(lián)合HGF促進間充質(zhì)干細胞向淋巴管內(nèi)皮細胞分化的研究.pdf
評論
0/150
提交評論