轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1在狼瘡腎炎的表達(dá)及甲潑尼龍干預(yù)效應(yīng).pdf

1、目的:研究轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)在BXSB狼瘡小鼠腎組織中的表達(dá)情況及甲潑尼龍是否可通過(guò)影響腎組織TGFβ1表達(dá)而改善狼瘡腎炎(LN)。 方法:將12只18周齡雄性已發(fā)病BXSB狼瘡小鼠按隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分成BXSB對(duì)照組(n=6)和甲潑尼龍組(n=6)；另隨機(jī)取6只同齡雄性BALB/c小鼠為正常組。BXSB甲潑尼龍組小鼠每日腹腔注射甲潑尼龍25mg/(kg·d)；BXSB對(duì)照組小鼠及BALB/c小鼠按體重比例每日腹腔注射

2、等體積生理鹽水。每周一次用代謝籠準(zhǔn)確收集各組小鼠24小時(shí)尿液，并用雙縮脲比色法測(cè)定24小時(shí)尿蛋白量。連續(xù)三周后處死并解剖小鼠，取左側(cè)腎組織，HE染色及VG染色檢查其病理變化，SP法免疫組織化學(xué)染色分析腎組織TGFβ1蛋白的表達(dá)情況；取右側(cè)腎組織，半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(RT-PCR)檢測(cè)TGFβ1mRNA的表達(dá)情況。 結(jié)果: 1)BXSB小鼠甲潑尼龍組和對(duì)照組用藥前后24小時(shí)尿蛋白水平均顯著高于BALB/c小鼠(

3、P＜0.01)；BXSB小鼠甲潑尼龍組用藥三周后尿蛋白水平與對(duì)照組比較明顯下降(P＜0.01)。 2)腎組織HE染色及VG染色病理檢查：BXSB小鼠腎小體彌漫性腫脹增大或萎縮硬化，腎小球細(xì)胞增生，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，腎小管變性、萎縮，腎間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，腎小球、腎小管周圍間隙有明顯膠原纖維沉積；甲潑尼龍組治療后上述病變減輕，腎小球細(xì)胞增生減輕，腎間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減少，纖維化病變改善。 3)半定量RT-PCR檢測(cè)：兩組BXSB小

4、鼠腎組織TGFβ1mRNA表達(dá)均明顯高于BALB/c小鼠(P＜0.01)；BXSB小鼠甲潑尼龍組腎組織TGFβ1mRNA表達(dá)顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)。 4)免疫組織化學(xué)檢測(cè)：TGFβ1主要表達(dá)于BXSB小鼠腎小球固有細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、腎間質(zhì)浸潤(rùn)的炎癥細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)，其中，對(duì)照組較甲潑尼龍組更明顯，BALB/c小鼠僅在少數(shù)腎小管上皮細(xì)胞有微弱表達(dá)；染色結(jié)果用北航CMIAS-98A圖像分析軟件進(jìn)行半定量分析，各組