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1、目的:觀察中波紫外線(UVB)對角質(zhì)形成細(xì)胞(HaCaT細(xì)胞)的損傷作用,氮氧化物(Tempol)對UVB照射所致HaCaT細(xì)胞損傷的保護作用并探討其發(fā)生機制,為其將來應(yīng)用于臨床提供理論依據(jù)。 方法:以培養(yǎng)HaCaT細(xì)胞為研究對象,用30mJ/Cm2的中波紫外線(UVB)照射細(xì)胞,重新加入培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)24小時后,研究UVB照射對細(xì)胞各種功能的影響,以MTT法檢測UVB對HaCaT細(xì)胞增殖活性的影響,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率,R
2、T-PCR及紫外透反凝膠成像法檢測細(xì)胞內(nèi)FoxO3a及BubR1 mRNA的表達情況。UVB照射前12h加入不同濃度的Tempol(0.5,1,2,4,8mM),再應(yīng)用上述方法分別檢測Tempol對上述各項指標(biāo)的影響。 結(jié)果:①UVB照射組細(xì)胞與正常對照組相比,UVB照射組細(xì)胞增殖活性降低,細(xì)胞凋亡率增高,UVB照射組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中,F(xiàn)oxO3a表達上調(diào),而BubR1的表達下調(diào),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。②加入不同濃度
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