紅花注射液對大鼠腎缺血再灌注損傷的保護作用研究.pdf

1、目的探討紅花注射液對大鼠腎缺血再灌注損傷(RIRI)的保護作用及其作用機制，為紅花注射液在臨床上用于RIRI的防治提供實驗依據(jù)。 方法將75只SD大鼠分為正常對照組、缺血再灌注組、小劑量、中劑量及大劑量治療組共5組，每組15只。采用首先切除右腎，然后阻斷左腎血流45min，恢復左腎血供24h的方法建立RIRI動物模型。除正常對照組外各組均需建立RIRI動物模型，實驗各組處理如下，正常對照組：開腹后不作任何處理，45min后關腹，

2、術前三天每天一次及術后24h每8h一次，經(jīng)尾靜脈注射生理鹽水3ml／kg。缺血再灌注組：術前術后用藥方法同正常對照組。小劑量、中劑量及大劑量治療組：術前三天每天一次及術后24h每8h一次，經(jīng)尾靜脈注射紅花注射液，注射劑量分別為小劑量組1．25ml／kg、中劑量組2．5ml／kg和大劑量組5mi／kg。實驗各組均于術后12小時始禁水至24小時處死動物。采集大鼠靜脈血及膀胱穿刺尿檢測血清肌酐、尿素和血尿滲透壓值等指標評價腎功能，取左腎采用H

3、E染色光鏡觀察實驗各組腎組織的變化，用TUNEL法檢測腎組織細胞凋亡率，用免疫組化法檢測腎組織Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表達的變化。 結果1、缺血再灌注組較正常對照組血清肌酐及尿素值明顯升高(P<0．05)，尿滲透壓和尿滲透壓／血滲透壓比值明顯降低(P<0．05)；采用紅花注射液治療后，大、中、小劑量治療組與缺血再灌注組相比血清肌酐及尿素值顯著下降(P<0．05)，尿滲透壓及尿滲透壓／血滲透壓比值顯著升高(P<0

4、．05)。且大劑量治療組較中、小劑量治療組血清肌酐值明顯降低，尿滲透壓及尿滲透壓／血滲透壓比值明顯升高(P<0．05)，而各治療組間血清尿素值無統(tǒng)計學差異(P>0．05)。2、光鏡觀察見，缺血再灌注組較正常對照組腎小管上皮細胞明顯水腫，核溶解細胞數(shù)明顯增加。小劑量、中劑量及大劑量治療組與缺血再灌注組相比，腎小管上皮細胞水腫有所減輕，核溶解細胞數(shù)減少。3、缺血再灌注組較正常對照組細胞凋亡率明顯升高(P<0．05)，各治療組與缺血再灌注組相

5、比凋亡率顯著降低(P<0．05)，治療組間相比，大劑量治療組較中、小劑量治療組細胞凋亡率明顯降低(P<0．05)，中劑量治療組與小劑量治療組間細胞凋亡率無統(tǒng)計學差異(P>0．05)。4、免疫組化結果顯示，缺血再灌注組Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表達均較正常對照組顯著升高(P<0．05)；小劑量、中劑量及大劑量治療組與缺血再灌注組相比，Caspase-3和Bax蛋白表達明顯下降(P<0．05)，Bcl-2蛋白表達明顯升高(P

6、<0．05)；治療組間相比，大劑量治療組較中、小劑量治療組Caspase-3和Bax蛋白表達明顯降低(P<0．05)，Bcl-2蛋白表達明顯升高(P<0．05)，中小劑量組間相比Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表達無統(tǒng)計學差異(P>0．05)。 結論缺血再灌注損傷可導致腎功能損害和細胞凋亡發(fā)生，表現(xiàn)為血清肌酐及尿素值升高，尿滲透壓及尿滲透壓／血滲透壓比值降低，細胞凋亡率增加，Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表