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文檔簡介
1、本文研究目的:人類的長壽現(xiàn)象更多的是一個體與外界的生存環(huán)境相適應(yīng)的結(jié)果。在與長壽有關(guān)的因素中,遺傳因素?zé)o疑是最重要或最主要的因素之一。人類基因組計劃的研究表明,人類基因中99.9﹪的遺傳密碼DNA都是一樣的,只有大約0.1﹪的基因不同,具有個體差異。因此,與人類長壽有關(guān)的遺傳因素很可能與這0.1﹪個體差異相關(guān)。目前,人類最大的遺傳多態(tài)性是人類白細(xì)胞抗原系統(tǒng)(HumanLeukocyteAntigen,HLA)和微衛(wèi)星DNA(shortt
2、andemrepeat,STR)。因此,選定HLA-Ⅰ類基因和15個STR系統(tǒng)的等位基因,旨在研究與人類長壽相關(guān)的遺傳因素。 研究方法:選取大連地區(qū),年齡在90歲以上的男性老人18人,作為觀察組。對照組隨機(jī)選取大連地區(qū)無償獻(xiàn)血志愿者男性50名,身體健康,體檢標(biāo)準(zhǔn)符合“全國采供血管理規(guī)范”。家族無遺傳病史,年齡在18-55周歲。 樣本采集,采靜脈血2ml,EDTA抗凝。HLA-A、B基因分型方法,采用SSO方法。首先,提取
3、DNA,進(jìn)行PCR擴(kuò)增。然后,按試劑盒說明書進(jìn)行變性與中和后再與磁珠雜交,用SAPE染色,洗滌后,讀板,計算機(jī)自動按順序讀取數(shù)據(jù)并分析出A、B、DR的特異性。 STR檢測采用IdentifilerPlusTM(ABI公司,美國)試劑盒,擴(kuò)增位點(diǎn)為D8S1179、D21S11、D7S820、CSF1PO、D3S1358、THO1、D13S317、D16S539、D2S1338、D19S433、VWA、TPOX、D18S51、D5S
4、818、FGA和Amelogenin性別位點(diǎn);采用310型DNAsequenceanalyzer進(jìn)行電泳檢測,檢測結(jié)果計算機(jī)軟件分析,得出分型結(jié)果。 研究結(jié)果: 1.兩組中共檢出HLA-A位點(diǎn)特異性10個;B位點(diǎn)特異性22個。比較觀察組與對照組中各等位基因的基因頻率沒有顯著差異(P>0.05),表明男性HLA-A、B位點(diǎn)等位基因與長壽無關(guān)。兩組中HLA-A、B位點(diǎn)的純合子基因數(shù)無顯著差異(P>0.05)。 2.男
5、性STR基因座位中,D7S820-8等位基因的基因頻率在兩組中有顯著性差異(P<0.01)。RR值為5.48,確認(rèn)此等位基因與長壽呈正相關(guān)性。D7S820-9、D13S317-12和D5S818-10也有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),RR值分別為0.19、0.235和0.359(小于1)。 3.男性STR基因座位中純合子基因?qū)﹂L壽也有影響。THO1基因位點(diǎn)純合子與長壽相關(guān)(P=0.049<0.05),計算RR值為0.268,小于1
6、。 4.綜合統(tǒng)計每組樣本中所有17個基因座位上的純合子數(shù)量,發(fā)現(xiàn)觀察組和對照組也有統(tǒng)計意義,即觀察組17個基因位點(diǎn)上的純合子數(shù)量明顯少于對照組(P<0.001)。 研究結(jié)論: 1.男性HLA-A、B基因位點(diǎn)上各等位基因與長壽無相關(guān)性。其基因座位上基因雜合性與長壽無相關(guān)性。 2.男性STR基因位點(diǎn)中等位基因D7S820-8與長壽呈正相關(guān),該等位基因?qū)﹂L壽有利。等位基因D7S820-9、D13S317-12和
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