德州地區(qū)雞冠狀病毒的分離鑒定與防治技術(shù)研究.pdf

1、雞冠狀病毒屬冠狀病毒科，冠狀病毒屬?？汕趾﹄u的呼吸系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)和消化系統(tǒng)，使雞發(fā)生傳染性支氣管炎。發(fā)病雞多數(shù)為30-60日齡的雛雞，發(fā)病率為30-100％，死亡率為3％-95％不等，給養(yǎng)雞業(yè)造成了巨大損失。根據(jù)雞其臨床表現(xiàn)的不同可分為呼吸型傳支、腎型傳支和腺胃型傳支。該病毒基因可因點(diǎn)突變和重組而發(fā)生變異，故傳染性支氣管炎病毒血清型較多。新的血清型不斷產(chǎn)生，臨床表現(xiàn)類型越來越多。給臨床診斷和免疫預(yù)防方面增加了難度，并且雞傳染性支氣管炎病

2、毒血清型間交叉保護(hù)力弱，從而給防制帶來一定困難，給養(yǎng)禽業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為明確本病發(fā)生和流行的病原，探索傳染性支氣管炎病毒在該病發(fā)生中的作用，為該病的防治提供理論依據(jù)，進(jìn)行了本研究。 1．通過流行病學(xué)調(diào)查搞清德州地區(qū)雞冠狀病毒的流行及其發(fā)病特點(diǎn)雞冠狀病毒可以導(dǎo)致雞傳染性支氣管炎的發(fā)生。雞傳染性支氣管炎目前在當(dāng)?shù)亓餍械难逍陀腥N，除臨床常見的傳統(tǒng)的呼吸型傳支以外，近幾年腎型傳支和腺胃型傳支也不斷流行。各種年齡的雞都易感，但感

3、染主要侵害1-4周齡的雛雞和幼雞，并引起死亡。 2．雞冠狀病毒的分離與鑒定分別從當(dāng)?shù)匾伤颇I型傳支和腺胃型傳支的病例中分離到冠狀毒株，接種雞胚并盲傳至第6代，并進(jìn)行了雞胚致病性試驗(yàn)、電鏡觀察、無菌試驗(yàn)、血凝試驗(yàn)、血清學(xué)試驗(yàn)和動(dòng)物回歸試驗(yàn)。證明我們分離到的以腺胃腫大為主要特征和以腎臟腫大、尿酸鹽沉積為主要特征的兩類毒株的病原都是冠狀病毒。 3．雞冠狀病毒油劑滅活苗的研制與應(yīng)用分別以當(dāng)?shù)氐湫筒‰u分離并經(jīng)過鑒定的F6代腎傳支毒株

4、和腺胃型傳支毒株作種毒，接種孵化至10天的雞胚尿囊腔中。孵化至120小時(shí)，采集尿囊液，加入甲醛滅活。滅活毒分別按1:3的比例加入油佐劑，混合后乳化分別制成了腎型傳支和腺胃型傳支油乳劑滅活苗。分別以當(dāng)?shù)氐湫筒‰u分離并經(jīng)過鑒定的F6代腎傳支毒株和腺胃型傳支毒株以及新城疫毒株作種毒，接種孵化至10天的雞胚尿囊腔中。孵化至120小時(shí)，采集尿囊液，加入甲醛滅活。按1:1的比例混合滅活毒，按1:3的比例加入油佐劑混合后乳化成新城疫一腎型傳支一腺胃型

5、傳支二聯(lián)二價(jià)油乳劑滅活苗。 4．雞冠狀病毒生物學(xué)特性的研究雞傳染性支氣管炎病毒為典型的冠狀病毒，基因組為單股正鏈RNA，可致雞胚矮小并干擾新城疫在雞胚中的復(fù)制。感染胚尿囊液無血凝性，但經(jīng)1％的胰酶處理后可凝集雞紅細(xì)胞。病毒接種雞胚，可引起雞的卷縮現(xiàn)象，雞胚發(fā)育遲緩，尿囊膜增厚，尿囊液增多而清澈，出現(xiàn)明顯的侏儒胚(胚體重量比正常胚體1/3-1/2左右)：雞胚腎臟腫大并有多量白色尿酸鹽沉積。電鏡觀察可見80-140nm大小的冠狀病毒

6、粒子。雞冠狀毒株對熱(56℃)、酸(pH3)、堿(pH 12)、乙醚和氯仿敏感。對反復(fù)凍融、胰酶不敏感。人工感染雞生長發(fā)育障礙、胸腺萎縮病雞出現(xiàn)典型的腎傳支或腺胃型傳支的病理變化。 5．總結(jié)出了在生產(chǎn)實(shí)踐中控制雞冠狀病毒的的經(jīng)驗(yàn)和措施，并加以推廣和應(yīng)用，取得了良好的社會和經(jīng)濟(jì)效益利用當(dāng)?shù)胤蛛x到的毒株研制雞新城疫-腎傳支-腺胃型傳支二聯(lián)二價(jià)油乳劑滅活苗，對當(dāng)?shù)厮曫B(yǎng)的蛋雞和肉雞進(jìn)行預(yù)防接種后，保護(hù)率達(dá)到了95.4-96.9％，普遍