松苗猝倒病生物防治細(xì)菌與定殖規(guī)律研究.pdf

1、濕地松(Pinus elliottii)是我國南方及湖北省重要的造林樹種，其所產(chǎn)松脂是重要的化工原料。在濕地松育苗期間，往往因猝倒病的危害，嚴(yán)重影響了育苗和造林。國內(nèi)外研究表明，松苗猝倒病由絲核菌(Rhizoctonia)、腐霉菌(Pythium)、鐮孢菌(Fusarium)、鏈格孢菌菌(Alternaria)、葡萄孢菌(Botrytis)、盤多毛孢菌(Pestalotia)等屬的多種真菌侵染引起，且不同地域病原菌種類不盡相同。本研究以

2、濕地松苗為研究對象，在詳細(xì)研究松苗猝倒病主要病原菌和根際微生物分布與變化規(guī)律的基礎(chǔ)上，以熒光假單胞菌和洋蔥伯克霍爾德菌等引進(jìn)與本土生防菌為研究材料，采用分子檢測技術(shù)，對生防菌在松苗根際的定殖規(guī)律以及抑病效果進(jìn)行了研究，主要內(nèi)容及結(jié)論如下： (一) 松苗根際微生物分布及數(shù)量變化規(guī)律 濕地松根際土壤中存在著大量的微生物，每克土中真菌菌落數(shù)量一般在1×10<'5>～3.5×10<'6>CFU(colony forming un

3、its)左右，細(xì)菌每克土一般為10<'7>～10<'8>CFU：真菌數(shù)量變化的高峰期出現(xiàn)在9月份，細(xì)菌數(shù)量變化高峰期出現(xiàn)在苗木移栽的4月份。細(xì)菌的種群數(shù)量增長速度快于真菌，在根際表面定殖的時(shí)間也早于真菌。 (二)松苗猝倒病主要病原真菌及致病性 湖北省濕地松苗圃的松猝倒病主要病原菌為立枯絲核菌(Rhizoctonia solaniKnhn.)、鏈格孢菌(Alternaria alternata(Fr.)Keissl.)和尖

4、孢鐮刀菌(Fusariumoxysporum Schl．)。立枯絲核菌的致病力最強(qiáng)，第7d致病率可達(dá)92.6％，尖孢鐮刀菌致病力次之，第7d的致病率最高可達(dá)89.5％，鏈格孢菌致病力較弱，第7d的致病率為48％，但第10d可達(dá)80％。 (三)生物防治細(xì)菌的篩選與鑒定 選擇鐮刀菌屬(Fusarium)中致病力最強(qiáng)的6株病原菌為供試菌株，對濕地松根際320株細(xì)菌分離物進(jìn)行了拮抗性篩選，共獲得27株具有拮抗性的細(xì)菌菌株，其中1

5、2株具有弱的拮抗性，5株具有中等程度的拮抗性，10株為強(qiáng)的拮抗性細(xì)菌菌株；用16S rDNA測序分析方法，對10株拮抗細(xì)菌分離物進(jìn)行了鑒定，7株為洋蔥伯克霍爾德菌(Burkholderia cepacia)，2株為枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)，1株待定。 (四)松苗根際生物防治細(xì)菌定殖規(guī)律研究 用美國引進(jìn)的8株熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens Q2-87，1M1-96．HT

6、5-1，Pf-5，MVP1-4，F(xiàn)FLlR8，2-79，Q37-87)菌株和本土篩選得到的1株洋蔥伯克霍爾德菌(Burkholderia cepacia C23)菌株進(jìn)行平皿對峙試驗(yàn)，供試病原真菌為立枯絲核菌A、B，尖孢鐮刀菌和鏈格孢菌：結(jié)果表明9株生防菌對鏈格孢菌和絲核菌的拮抗能力強(qiáng)，對鐮刀菌的拮抗能力都較弱；其中C23和Q2-87對絲核菌和鏈格孢菌都表現(xiàn)出較好的拮抗作用；室內(nèi)外根際接菌后的分子檢測表明：兩個(gè)菌株在濕地松幼苗根際都具有