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文檔簡介
1、目的:尋找腎移植急性排斥反應(yīng)患者血清中所特有的蛋白質(zhì)標(biāo)志物,為臨床腎移植急性排斥反應(yīng)非侵入性的早期診斷、預(yù)警和特異性標(biāo)志物的篩選提供靈敏的實驗室指標(biāo)。 方法:應(yīng)用美國Ciphergen PBSⅡ表面增強(qiáng)激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜儀(surface-enhanced laser desorption/ionizationtime of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)蛋白組學(xué)研究平臺,對腎
2、移植患者術(shù)前、術(shù)后的血清進(jìn)行檢測,其中5例病理診斷為急性排斥組(血清標(biāo)本共30份),25例為術(shù)后穩(wěn)定組(血清標(biāo)本共50份),15例尿毒癥疾病對照組(血清標(biāo)本共30份)。采用BMW(Biomarker Wizard)軟件和BPSS5.0(Biomarker patterns systems)軟件分析差異蛋白峰,建立診斷模型,以此模型進(jìn)行雙盲驗證,并對急性排斥組進(jìn)行單個患者的縱向分析。 結(jié)果:M/Z位于1000-100000范圍內(nèi),
3、腎移植急性排斥反應(yīng)組和術(shù)后穩(wěn)定組血清中共檢測到188個差異蛋白質(zhì)峰(p<0.05),其中有51個顯著差異蛋白P<0.001,這些差異顯著的蛋白峰聚集在3888~5905、7344~9501以及11342~11940、12149~14687范圍內(nèi)。經(jīng)BMW軟件分析發(fā)現(xiàn),在這些蛋白質(zhì)峰中有24個蛋白峰出現(xiàn)從疾病對照組到急性排斥組、穩(wěn)定存活組依次遞增或遞減的趨勢,其中有14個蛋白峰依次遞增,10個依次遞減。由BPS軟件分析篩選出的M_8136
4、和M_5872這2個蛋白峰組成的蛋白質(zhì)質(zhì)譜分類決策樹,能判別腎移植急性排斥組、穩(wěn)定存活組以及疾病對照組,敏感度、特異度高,并能用于判斷腎移植急性排斥組的排斥期和緩解期。 結(jié)論:SELDI-TOF MS技術(shù)平臺可用于篩選腎移植患者血清中的特異性標(biāo)志物。所得到的差異性蛋白峰M_8136和M_5872的診斷模型敏感度和特異度高,可用于診斷腎移植急性排斥反應(yīng),并且對其早期預(yù)警以及治療有一定臨床意義。所獲得的差異性蛋白峰有利于腎移植急性排
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