正常人耵聹中馬拉色菌菌種構(gòu)成及限制性片段長度多態(tài)性分析.pdf

1、目的：研究正常人耵聹中馬拉色菌菌種構(gòu)成，及同一宿主的左、右耳道內(nèi)耵聹中菌種是否一致。并用限制性內(nèi)切酶建立酶切圖譜，探討馬拉色菌菌種鑒定方法。 方法：以11株標準株為對照，首先采用生化和形態(tài)學(xué)方法將來源于44例志愿者的88株臨床菌株鑒定到種，在各種中隨機挑取菌株，利用改良氯化芐法提取基因組DNA，設(shè)計引物擴增26S rDNA并測序以相互印證。據(jù)已知序列，采用DNAssist2.0軟件設(shè)計酶切位點，構(gòu)建酶切圖譜。 結(jié)果：

2、 1、共分離出5個種：糠秕馬拉色菌(32.95％)、斯洛菲馬拉色菌(26.14％)、合軸馬拉色菌(20.45％)、球形馬拉色菌(12.50％)、限制性馬拉色菌(7.95％)； 2、44例(88株菌)中雙側(cè)耵聹菌種相同者有38例(76株菌)(一致率86.36％)； 3、改良氯化芐法能成功提取馬拉色菌基因組DNA。 4、利用一種限制性內(nèi)切酶(CfoI)即可產(chǎn)生不同的酶切條帶，成功地將分離出的5個種鑒別開。