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1、為明確轉(zhuǎn)Bt基因棉花生殖器官的發(fā)育對(duì)其殺蟲蛋白表達(dá)量的影響,以Bt棉常規(guī)種泗抗1號(hào)和雜交種泗抗3號(hào)為材料,2015-2016年于揚(yáng)州大學(xué)遺傳生理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,在盛蕾期和盛鈴期分別設(shè)計(jì)不同種植密度(1.5、3、4.5、6、7.5萬(wàn)株/公頃)和不同施氮量(0、75、150、225和300kgN/公頃)處理試驗(yàn),探討蕾鈴發(fā)育對(duì)Bt殺蟲蛋白表達(dá)量影響及其氮代謝生理機(jī)制。結(jié)果如下:
1、不同施氮量水平下,盛蕾期單株蕾量、蕾體積及蕾干重均表
2、現(xiàn)為隨施氮量的增加而增加,在蕾量、蕾體積和干重增大的同時(shí),棉蕾中Bt蛋白含量也相應(yīng)增加。如現(xiàn)蕾后30天,常規(guī)種(SK-1)由不施氮至常規(guī)施氮量時(shí),單株蕾量分別由16.1個(gè)·株-1增加至32個(gè)·株-1、蕾體積分別由1.04cm3增加至2.42cm3、蕾干重分別由0.16g增加至0.24g;棉蕾Bt蛋白含量分別由281.25ng·g-1FW增加至354.19ng·g-1FW;雜交種(SK-3)單株蕾量分別由16.5個(gè)·株-1增加至34.9個(gè)
3、·株-1、蕾體積分別由1.16cm3增加至2.52cm3、蕾干重分別由0.16g增加至0.26g;棉蕾Bt蛋白含量分別由279.88ng·g-1FW增加至352.88ng·g-1FW。同樣,棉株現(xiàn)蕾?gòu)?qiáng)度、蕾體積和干重日增量增加,棉蕾中Bt蛋白濃度日增量也相應(yīng)增大。如在6/26至7/23時(shí),SK-1在施氮水平為常規(guī)施氮量1/4時(shí),現(xiàn)蕾?gòu)?qiáng)度為0.48個(gè)·d-1·株-1;施氨水平為常規(guī)施氮量3/4時(shí)現(xiàn)蕾?gòu)?qiáng)度為0.66個(gè)·d-1·株-1。相應(yīng)地
4、Bt蛋白濃度日增量分別為8.97ng·g-1FW·d-1和9.78ng·g-1FW·d-1。不同密度水平下,盛蕾期蕾量、蕾體積及干重均表現(xiàn)為在低密度(D1,1.5萬(wàn)株/公頃)時(shí)大,在高密度(D5,7.5萬(wàn)株/公頃)時(shí)小,蕾中Bt蛋白含量也同樣表現(xiàn)為低密度大,高密度小,且2個(gè)類型品種表現(xiàn)一致。如現(xiàn)蕾后30日時(shí),SK-1在低密度(D1)和高密度(D5)時(shí),蕾體積分別為2.5cm3和1.12cm3,Bt蛋白含量分別為342.21和278.18
5、ng·g-1FW;SK-3的蕾體積分別為2.5cm3和1.34cm3,Bt蛋白含量分別為349.82和274.36ng·g-1FW。棉株現(xiàn)蕾?gòu)?qiáng)度、蕾體積和干重日增量同樣表現(xiàn)為在低密度時(shí)大,高密度時(shí)小;棉蕾中Bt蛋白濃度日增量也表現(xiàn)相似地變化。如現(xiàn)蕾后20-30天時(shí),SK-3在低密度(D1)和高密度(D5)時(shí),蕾體積日增量分別為0.112cm3·d-1和0.088cm3·d-1,蕾的Bt蛋白濃度日增量分別為7.81ng·g-1FW·d-1
6、和6.93ng·g-1FW·d-1。相關(guān)分析表明,蕾量、體積、干重與Bt蛋白含量都呈顯著以上水平正相關(guān)(如施氮量水平下SK-1蕾量、體積、干重與Bt蛋白含量的相關(guān)系數(shù)分別為0.925,0.968,0.938);現(xiàn)蕾?gòu)?qiáng)度、蕾體積和干重日增量與Bt蛋白濃度日增量同樣呈顯著以上水平正相關(guān)(如密度水平下SK-3現(xiàn)蕾?gòu)?qiáng)度、蕾體積和干重日增量與Bt蛋白濃度日增量的相關(guān)系數(shù)分別為0.975,0.953,0.844)。
2、不同施氮量水平下,
7、整株鈴量、鈴體積和鈴干重以常規(guī)施氮量時(shí)最大,但鈴殼中Bt蛋白含量最低,施氮量分別為常規(guī)施氮量的1/4、1/2、3/4和常規(guī)施氮量時(shí),花后20天SK-1鈴體積分別比對(duì)照增加了17.64%、29.95%、39.27%、51.58%,相應(yīng)地鈴殼中Bt蛋白含量分別比對(duì)照下降了8.35%、13.23%、22.54%、29.08%;雜交種SK-3鈴體積分別增加了18.6%、28.14%、36.72%、47.69%,鈴殼Bt蛋白分別下降6.24%、1
8、7.87%、23.63%、30.4%;花后10至40天,SK-1成鈴強(qiáng)度分別比對(duì)照增加了7.4%、14.8%、22.2%、37%,SK-3增加了4%、12%、24%、44%。相應(yīng)地鈴殼中Bt蛋白濃度日增量SK-1分別比對(duì)照下降了6.1%、9.3%、19.6%、30.4%,SK-3比對(duì)照下降了7.1%、10.9%、36.8%、37.6%。不同密度水平下,整株鈴量、棉鈴體積和棉鈴干重在低密度下大,高密度下小;相反,鈴殼中Bt蛋白含量在低密度
9、下低,高密度下高。如花后20天,SK-1在D1和D5密度處理下鈴量、體積分別為21個(gè)·株-1、18.92cm3和10.67個(gè)·株-1、11.98cm3,鈴殼中Bt蛋白含量分別為124.27和163.97ng·g-1FW; SK-3在D1和D5密度處理下鈴量、體積分別為26.33個(gè)·株-1、19.47cm3和12個(gè)·株-1、12.28cm3,鈴殼中Bt蛋白含量分別為129.51和170.83ng·g-1FW。在低密度下時(shí)鈴殼中Bt蛋白濃度
10、日增量也最低,如在花后10-40天,常規(guī)種SK-1鈴殼Bt蛋白濃度日增量在D1和D5密度處理下分別為1.82和2.21ng·g-1FW·d-1,雜交種SK-3分別為1.98和2.13ng·g-1FW·d-1。2個(gè)類型品種表現(xiàn)一致。不同施氮量和密度水平下,纖維和棉子中的Bt蛋白含量及其日增量的變化與鈴殼呈相似的特征。相關(guān)分析表明,鈴量、體積、干重與Bt蛋白含量都呈顯著以上水平負(fù)相關(guān)(如施氮量水平下SK-1鈴量、體積、干重與鈴殼Bt蛋白含量
11、的相關(guān)系數(shù)分別為-0.879,-0.895,-0.923),成鈴強(qiáng)度、鈴體積和干重日增量與Bt蛋白濃度日增量也呈顯著以上水平負(fù)相關(guān)(如施氮量水平下SK-1成鈴強(qiáng)度、鈴體積和干重日增量與鈴殼Bt蛋白濃度日增量的相關(guān)系數(shù)分別為-0.861,-0.877,-0.905)。
3、盛蕾期棉蕾中Bt蛋白含量及Bt蛋白濃度日增量增加的同時(shí),可溶性蛋白含量、GPT和GOT活性上升,游離氨基酸含量、蛋白酶和肽酶活性下降。盛鈴期鈴殼、棉子及纖維中
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