棉鈴蟲對(duì)擬除蟲菊酯氧化代謝抗性的生化與分子機(jī)理.pdf

1、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文棉鈴蟲對(duì)擬除蟲菊酯氧化代謝抗性的生化與分子機(jī)理姓名：楊亦樺申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治指導(dǎo)教師：韓召軍20050601YYangBiochemicalandMolecularMechanismsofOxidativeMetabolismforPyrcthroidResistanceinHarmigerarPAK品系中，PBO處理后對(duì)氰戊菊酯的抗性從1690倍和2320倍下降到4倍和5倍，抗性幾乎被全

2、部抑制。進(jìn)一步比較棉鈴蟲抗性和敏感品系末齡幼蟲中腸的細(xì)胞色素P450氧化酶的對(duì)硝基苯甲醚O一脫甲基作用(PNOD)、甲基試鹵靈O一脫甲基作用(MROD)、乙氧基香豆素O一脫乙基作用(ECOD)和艾氏刺環(huán)氧化作用(AE)的活力發(fā)現(xiàn)，YGF、YGFP、YG、IND、PAK的PNOD活力分別是SCD敏感品系的117、65、21、153和135倍，ECOD活力分別是29、52、11、266和81倍，MROD活力分別是32、62、37、77和38

3、倍，與抗性水平表現(xiàn)出顯著的正相關(guān)性。這表明抗性品系幼蟲體內(nèi)細(xì)胞色素P450氧化酶系對(duì)擬除蟲菊酯可能具有較強(qiáng)的解毒代謝能力。血紅素過氧化物酶活力測(cè)定也表明抗性品系中高活性的個(gè)體比例明顯高于敏感品系，平均活性是敏感品系的11到24倍。血紅素過氧化物酶活力增高表明細(xì)胞色素P450總蛋白含量的增加，而與抗性相關(guān)的特異同工酶的含量可能具有更大幅度的增加。在YGF、YGFP、IND和PAK這4個(gè)抗性品系中，末齡幼蟲中腸谷胱甘肽一s一轉(zhuǎn)移酶活性比SC

4、D敏感品系略有上升，而酯酶活力則沒有差異，說明谷胱甘肽一S一轉(zhuǎn)移酶和酯酶在亞洲棉鈴蟲對(duì)擬除蟲菊酯抗性中不是主要因子。綜合增效實(shí)驗(yàn)和解毒酶活性分析的結(jié)果，可以看出氧化解毒代謝增強(qiáng)是棉鈴蟲對(duì)擬除蟲菊酯抗性的主要機(jī)理。2棉鈴蟲抗、感品系對(duì)溴氰菊酯的離體代謝為了獲得抗性品系氧化解毒增強(qiáng)的直接證據(jù)，比較了PAK抗性品系和SCD敏感品系中腸微粒體對(duì)溴氰菊酯的離體代謝能力。PAK品系中腸微粒體細(xì)胞色素P450氧化酶MROD、ECOD活力分別是SCD品

5、系的25、112倍。在反應(yīng)體系中加入NADPH，進(jìn)行氧化酶代謝降解后，PAK抗性品系微粒體代謝反應(yīng)液中，未被代謝的溴氰菊酯只有原來的157％，而SCD敏感品系的是413％，抗性品系的氧化解毒代謝能力是敏感品系的26倍。對(duì)照在反應(yīng)體系中不加NADPH，剔除微粒體氧化代謝后，PAK品系與SOD品系對(duì)溴氰菊酯的代謝能力沒有顯著差異，未被降解的溴氰莉酯分別為486％和545％。上述結(jié)果表明，氧化酶的確參與了溴氰菊酯的代謝，而且抗性品系的微粒體對(duì)