蘋果酸奈諾沙星膠囊的人體藥代動(dòng)力學(xué)及藥代動(dòng)力學(xué)-藥效學(xué)研究.pdf

1、奈諾沙星為無氟喹諾酮類抗菌新藥(NFQ),不同于傳統(tǒng)的氟喹諾酮類抗菌藥,為新一代選擇性細(xì)菌拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑,通過作用于細(xì)菌DNA旋轉(zhuǎn)酶抑制DNA合成而達(dá)殺菌效果。體外抗菌作用顯示,奈諾沙星具有很強(qiáng)的廣譜抗菌作用,對(duì)革蘭陽性菌和陰性菌、厭氧菌及非典型病原體均有作用,其中對(duì)鏈球菌屬和葡萄球菌屬尤其有效,包括多重耐藥的肺炎鏈球菌和甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌(MRSA)。目前奈諾沙星作為1.1類新藥由國家食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)批準(zhǔn)在中國

2、進(jìn)行Ⅰ期臨床試驗(yàn),包括耐受性試驗(yàn)和藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)。已完成的耐受性試驗(yàn)結(jié)果顯示,中國健康志愿者單次空腹口服蘋果酸奈諾沙星膠囊在125mg～1000mg劑量范圍內(nèi)具有良好的耐受性和安全性。因此,可以進(jìn)行單次給藥藥代動(dòng)力學(xué)研究,包括蘋果酸奈諾沙星250mg、500mg、750mg單次給藥藥物代謝動(dòng)力學(xué)(Pharmacokinetics,PK,以下簡稱藥動(dòng)學(xué))研究以及進(jìn)食對(duì)奈諾沙星藥動(dòng)學(xué)特征的影響。并進(jìn)一步進(jìn)行多次給藥藥動(dòng)學(xué)研究,包括連續(xù)10天

3、口服蘋果酸奈諾沙星膠囊500mg和750mg后的藥動(dòng)學(xué)和耐受性試驗(yàn)。基于口服蘋果酸奈諾沙星膠囊單次及多次給藥藥代動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果,結(jié)合前期國內(nèi)進(jìn)行的該藥的體外藥效學(xué)(Pharmacodynamics,PD)研究資料,進(jìn)行PK/PD研究,為蘋果酸奈諾沙星膠囊Ⅱ期臨床試驗(yàn)方案中有關(guān)適應(yīng)證及給藥方案制定提供參考。
　　本研究包括以下四個(gè)部分:
　　第一部分奈諾沙星血漿、尿液濃度檢測方法的建立及驗(yàn)證
　　為進(jìn)行蘋果酸奈諾沙星膠囊

4、在中國健康受試者中單次及多次給藥藥動(dòng)學(xué)研究,本部分建立了HPLC-MS/MS方法測定血漿及尿液中的奈諾沙星藥物濃度。采用WatersAlliance2690型系列高效液相色譜儀及FinniganTSQQuantumDiscoveryMax型三級(jí)四極桿質(zhì)譜儀,固定相為:WatersSymmetryShieldRPl8柱(50mm×2.1mm,5μm),流動(dòng)相為:0.1％甲酸:乙腈(82:18)和0.1％甲酸:乙腈(85:15)分別檢測血漿

5、和尿液樣本。我們建立了以直接蛋白沉淀法、液-液萃取法預(yù)處理樣品的簡便、快速、高靈敏度的LC-MS/MS方法,分別用于檢測人血漿及尿液中奈諾沙星的濃度,內(nèi)標(biāo)為加替沙星。奈諾沙星的血漿和尿液濃度的最低檢測限均為0.005μg/mL。血漿溶液和尿液溶液中,奈諾沙星的萃取回收率分別為(98.49±4.69)％和(84.92±6.81)％,日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(RSD)分別為≤5.87％和≤8.30％,日間RSD分別為≤6.94％和≤5.43％,方法回

6、收率分別為(99.27～103.75)％和(103.52～115.94)％,血及尿質(zhì)控樣本室溫放置穩(wěn)定時(shí)間均達(dá)24h,預(yù)處理后室溫放置于24h之內(nèi)均保持穩(wěn)定,-40℃冰箱凍融3次前后濃度基本相同。-40℃長期放置3個(gè)月時(shí)回收率分別為(92.14～110.87)％和(83.55～101.95)％。本測定方法及驗(yàn)證結(jié)果符合SFDA藥品審評(píng)中心有關(guān)藥代動(dòng)力學(xué)研究原則中生物樣品的分析要求。
　　第二部分健康受試者單次口服蘋果酸奈諾沙星膠囊

7、250rag、500mg和750mg的藥代動(dòng)力學(xué)特征以及進(jìn)食對(duì)奈諾沙星藥代動(dòng)力學(xué)的影響
　　本研究分為兩個(gè)階段。第一階段為隨機(jī)、開放、三周期、三劑量拉丁方交叉設(shè)計(jì),研究12例中國健康受試者(男女各半)分別空腹單次給予蘋果酸奈諾沙星膠囊250mg、500mg和750mg的藥動(dòng)學(xué)特征;第一階段結(jié)束后經(jīng)過7天的清洗期進(jìn)入第二階段,為12例受試者在進(jìn)食高脂試驗(yàn)餐后給予蘋果酸奈諾沙星膠囊500mg,研究進(jìn)食對(duì)奈諾沙星藥動(dòng)學(xué)的影響。按時(shí)留取受

8、試者的血漿、尿液樣本,以HPLC-MS/MS法測定其血漿和尿液樣本中奈諾沙星的藥物濃度,并根據(jù)受試者單次口服蘋果酸奈諾沙星膠囊后測得的血漿及尿液中原形藥物濃度,采用WinNonlin5.2.1軟件(PharsightCorp.CAUSA)以非房室模型分析法計(jì)算各項(xiàng)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。研究結(jié)果顯示受試者單次空腹口服蘋果酸奈諾沙星膠囊250mg、500mg和750mg后吸收迅速,各劑量組于給藥1～2小時(shí)內(nèi)達(dá)血藥峰濃度,Cmax分別為3.237μg/

9、ml、5.909μg/mL和8.525μg/mL。AUC0-72h分別為21.40μg·h/mL、42.17μg·h/mL和66.26μg·h/mL,AUC0-∞分別為21.52μg·h/ML、42.41μg·h/mL和66.54μg·h/mL。T1/2分別為10.73h、12.83h和11.01h。CLt/F分別為11.88L/h、11.98L/h和14.41L/h。給藥后72h內(nèi)分別排出了給藥量的70.28％、67.05％和66.9

10、2％。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示蘋果酸奈諾沙星膠囊在250mg～750mg劑量范圍內(nèi)AUC0-∞、AUCo-72h、Cmax與劑量間呈線性關(guān)系,確認(rèn)了其劑量比例性。
　　蘋果酸奈諾沙星膠囊500mg進(jìn)餐組與空腹組比較,進(jìn)餐組Cmax降低,為3.895μg/mL;Tmax延遲了近3h,為3.64h:AUC0-∞降低約20％,為34.53μg·h/mL;兩組AUCo-∞相比,進(jìn)餐組為空腹組的82.16％。兩組T1/2基本相近,分別為14.99h

11、和12.83h。進(jìn)餐組尿排出率低于空腹組,Ae0-72h為54.25％。統(tǒng)計(jì)分析顯示,兩組間AUC0-72h、AUC0-∞、Cmax、Tmax、CLt/F、UA0-72h(72h尿排出量)和Ae0-72h(72h尿排出率)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組間C24h和T1/2差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　蘋果酸奈諾沙星膠囊在250mg～750mg劑量范圍內(nèi)AUC0-∞、AUC0-72h、Cmax與劑量間呈線性關(guān)系,中國健康志愿者進(jìn)食后口服蘋果酸奈

12、諾沙星膠囊將減慢其吸收速率和降低其吸收程度。
　　第三部分健康受試者連續(xù)10天口服蘋果酸奈諾沙星膠囊500mg或750mg后的藥代動(dòng)力學(xué)特征和耐受性
　　本部分采用開放設(shè)計(jì),共入組24例中國健康受試者,分為兩個(gè)劑量組,每組男女各半。第一組每位受試者連續(xù)10天口服蘋果酸奈諾沙星膠囊500mg,每日1次,第二組每位受試者連續(xù)10天口服蘋果酸奈諾沙星膠囊750mg,每日1次。所有受試者在試驗(yàn)期間按時(shí)留取血、尿樣本,并對(duì)其進(jìn)行安全性

13、觀察。在給藥第1天和第10天留取受試者全程PK血、尿樣本,在給藥第3日、5日、8日、9日留取其給藥前、后的谷、峰濃度血樣,上述所有血、尿樣本采用HPLC-MS/MS方法測定其藥物濃度,并對(duì)其結(jié)果進(jìn)行藥動(dòng)學(xué)分析并作安全性評(píng)價(jià)。
　　研究結(jié)果顯示蘋果酸奈諾沙星膠囊500mg多次給藥組第1天Cmax為6.462μg/mL,C24h為0.320μg/mL,AUC0-24h為43.94μg·h/mL,Tmax中位數(shù)為1h。第10天穩(wěn)態(tài)時(shí)Cm

14、ax、C24h和AUC0-24h與第1天基本相近,Cavg為1.955μg/mL,總體清除率CLss/F為11.32L/h,Vd/F為107.64L。500mg日1次連續(xù)給藥后血藥谷峰濃度波動(dòng)系數(shù)(DF)為345.85％。積蓄因子為1.09。500mg多次給藥組第1天和第10天給藥后24h平均累積排出率分別為給藥量的54.81％和50.81％。
　　蘋果酸奈諾沙星膠囊750mg多次給藥組第1天Cmax為9.378μg/mL,C24

15、h為0.541μg/mL,AUC0-24h為63.25μg·h/mL,Tmax中位數(shù)為1.75h。第10天穩(wěn)態(tài)時(shí)CmaxC24h和AUC0-24h亦與第1天基本相近,穩(wěn)態(tài)時(shí)Cavg為2.739μg/mL,CLss/F為11.64L/h,Vd/F為113.27L。750mg日1次連續(xù)給藥后血藥谷峰濃度DF為319.15％。積蓄因子為1.10。750mg多次給藥組第1天和第10天給藥后24h平均累積排出率分別為給藥量的56.24％和65.3

16、8％。
　　500mg和750mg多次給藥組第1天與第10天Cmax、C24h、AUC0-24h和UA0-24h、AE0-24h參數(shù)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　第四部分蘋果酸奈諾沙星膠囊的PK/PD研究及給藥方案評(píng)價(jià)
　　根據(jù)PK/PD概念,氟喹諾酮類藥物為濃度依賴性抗菌藥。其主要PK/PD參數(shù)為(Cmax)和MIC比值(Cmax/MIC)以及藥時(shí)曲線下面積(AUC)與MIC之比值(AUC

17、/MIC)。奈諾沙星為無氟喹諾酮類抗菌藥,目前尚無相關(guān)文獻(xiàn)確定其PK/PD特性?，F(xiàn)根據(jù)一般喹諾酮類藥物PK/PD特性,定義其屬濃度依賴性抗菌藥,PK/PD參數(shù)為Cmax/MIC和AUC/MIC。根據(jù)本研究根據(jù)第三部分奈諾沙星藥動(dòng)學(xué)研究結(jié)果,結(jié)合本研究所前期完成的奈諾沙星體外藥效學(xué)結(jié)果,應(yīng)用MonteCarlo模擬,計(jì)算奈諾沙星500mg和750mg每日1次給藥、連續(xù)10日的2種給藥方案藥效學(xué)達(dá)標(biāo)概率(theprobabilityofta

18、rgetattainment)。以Cmax/MIC值≥5以及AUC24h/MIC值≥25的概率作為預(yù)期可獲滿意臨床療效的靶值,以Cmax/MIC值≥8以及AUC24h/MIC值≥60的概率作為預(yù)期可獲滿意臨床和細(xì)菌學(xué)療效,并有效預(yù)防細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生的靶值,結(jié)果當(dāng)Cmax/MIC值=5和AUC24h/MIC值=25為靶值時(shí),除MRSA外,2種給藥方案對(duì)受試菌種的藥效學(xué)達(dá)標(biāo)概率均能達(dá)90％以上,提示可獲滿意臨床和細(xì)菌學(xué)療效。當(dāng)Cmax/MIC