蕎麥種質CHS基因遺傳多樣性研究.pdf

1、苦蕎是富含黃酮的蓼科（Polygobaceae）蕎麥屬的醫(yī)食同源作物，是一種具有較好應用前景的功能食品。苦蕎蛋白是重要的營養(yǎng)成分，苦蕎種質中的蛋白含量對育種和產品質量有很大影響。查爾酮合酶(CHS)基因是苦蕎黃酮合成途徑中的關鍵基因，其多樣性直接影響苦蕎的黃酮含量。本研究通過對苦蕎種子蛋白遺傳多樣性和苦蕎CHS基因多樣性進行研究，為發(fā)掘利用苦蕎高黃酮基因資源、關聯(lián)分析及SNP分子標記輔助育種奠定基礎。
　　采用SDS聚丙烯酰胺凝膠

2、電泳(SDS-PAGE)技術對來自14個不同地理來源的166份苦蕎材料的種子蛋白進行遺傳多樣性分析。結果共檢測出21種遷移率不同的條帶，其中多態(tài)性條帶為14條，多態(tài)性比例為66.67％，分布于13.84～100.75 kDa之間。不同地理來源的苦蕎種質的Shannon多樣性指數為0.4238～0.6931，總蛋白的遺傳相似系數為0.8376～0.9931，平均相似系數為0.9187。用Popgen Ver.1.32軟件根據不同地理來源苦

3、蕎資源群間遺傳相似系數可聚類成3大類，聚類結果與苦蕎地理分布相關，表明苦蕎種子蛋白遺傳多樣性與其地理來源有一定的相關性，但由于條帶較少和多態(tài)性區(qū)分較難，用SDS-PAGE技術在苦蕎種質鑒定上有明顯的局限性。
　　采用染色體步移技術獲得四川老鴉苦蕎CHS基因的全長序列，以該序列為基礎，設計引物，PCR擴增，獲得30份黃酮含量不同的苦蕎材料的CHS基因序列，對其進行多樣性分析。結果表明:在30份苦蕎的CHS基因序列中共檢測到98個多態(tài)