腫瘤反應(yīng)性對TGF-β不敏感的CTL細(xì)胞對異種移植裸鼠前列腺癌治療作用的研究.pdf

1、目的：利用裸小鼠建立人前列腺癌腫瘤動物模型，再利用腫瘤反應(yīng)性TGF-β不敏感的CTL進(jìn)行治療試驗；收獲裸鼠移植瘤塊，利用其滿足相關(guān)實驗研究需要，如TGF-β水平測定、腫瘤相關(guān)抗原的提取等；將裸鼠體內(nèi)過繼培養(yǎng)所得瘤塊進(jìn)行原代培養(yǎng)并與直接組織塊培養(yǎng)方法進(jìn)行對比，探索更好的細(xì)胞原代培養(yǎng)方法。 方法：將自前列腺癌根治手術(shù)中獲得的前列腺癌組織標(biāo)本，接種于4周齡、雄性的裸小鼠右腋側(cè)皮下，待瘤塊生長至合適大小后取下瘤塊，部分凍存，其余按相同的

2、方法進(jìn)行傳代，如此一共3次，獲得前列腺癌腫瘤動物模型。將大部分荷瘤裸鼠模型隨機分成2組，通過鼠尾靜脈注射本實驗室提供的CTL進(jìn)行前列腺癌免疫治療的體內(nèi)實驗，觀察并記錄數(shù)據(jù)，最后利用SPSS統(tǒng)計軟件分析治療結(jié)果；收獲裸鼠瘤塊，凍存一部分用ELISA方法測定TGF-β水平、提取腫瘤相關(guān)抗原并刺激腫瘤反應(yīng)性CTL增殖；其余新鮮組織用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行前列腺癌細(xì)胞原代培養(yǎng)，觀察細(xì)胞生長狀態(tài)。 結(jié)果： 1.獲得前列腺癌腫瘤動物模型1

3、4只，利用12只(治療中死亡1只)隨機分為兩組進(jìn)行治療實驗，治療前兩組平均體積對比經(jīng)SPSS13.0軟件進(jìn)行t檢驗，P>0.05，差別無統(tǒng)計學(xué)意義，治療后體積對比p<0.01，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義； 2.將剩余2只裸鼠瘤塊大部分收集凍存，與之前凍存的瘤塊一起用于提取腫瘤相關(guān)抗原并刺激CTL增殖。加入腫瘤抗原與不加腫瘤抗原相比，CTL數(shù)量擴增明顯；同一患者血清FGF-β水平為4.873ng/ml，裸鼠種植與手術(shù)所獲瘤塊TGF-β水平

4、為12.116ng/ml、8.368ng/ml，前者大于后者。 3.裸鼠過繼培養(yǎng)來源的組織塊進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)，雖然沒有建立穩(wěn)定傳代的細(xì)胞系，但與直接組織塊培養(yǎng)法結(jié)果對比，細(xì)胞成分更為單一，生長和增殖能力增強。 結(jié)論： 1.利用TGF-β不敏感腫瘤反應(yīng)性的CTL細(xì)胞進(jìn)行前列腺癌免疫治療研究具有重要的臨床應(yīng)用價值，利用裸鼠建立前列腺癌荷瘤模型，并以此作為載體進(jìn)行體內(nèi)治療實驗研究是簡捷、經(jīng)濟、有效的研究方法。