6,7-二羥基香豆素對小鼠大腦中動脈阻斷后缺血再灌注損傷的保護.pdf

1、目的：
　　觀察6,7-二羥基香豆素（Esculetin, Esc）對小鼠大腦中動脈阻斷后缺血/再灌注（I/R）損傷的保護作用，探討Esc對腦I/R損傷細胞凋亡影響的機制。
　　方法：
　　成年雄性Institute of Cancer Research（ICR）小鼠，體重23～25g，建立小鼠短暫大腦中動脈阻斷（MCAO）后I/R損傷模型（缺血75 min，再灌注24 h），隨機分為4組。假手術(shù)組（Sham組）、Es

2、c對照組（Esc組）、I/R組、Esc處理組（I/R+Esc組）。I/R組和I/R+Esc組行MCAO，Sham組和Esc組不置入線栓。腦缺血前30 min或者再灌注后2、4、6 h，Esc和I/R+Esc組小鼠側(cè)腦室注射Esc20μg或腦缺血前1 h、再灌注即刻、再灌注后2 h腹腔注射Esc10、50、100 mg/kg，Sham組及I/R組小鼠側(cè)腦室注射10μl無菌生理鹽水或者按0.1 ml/10g腹腔注射無菌生理鹽水。再灌注24

3、h后，進行神經(jīng)行為學(xué)評分，并采用氯化三苯四氮唑染色法測定右側(cè)半腦梗死體積，計算右側(cè)半腦梗死體積與右側(cè)半腦的體積比；采用Western blot法測定腦組織凋亡相關(guān)蛋白Bax，Bcl-2及Cleaved Caspase3蛋白的表達水平。
　　結(jié)果：
　　腦梗死體積及神經(jīng)行為學(xué)評分：（1）側(cè)腦室給藥：①缺血前30 min時，與I/R組相比，I/R+Esc組腦梗死體積縮?。≒＜0.05），神經(jīng)行為學(xué)評分改善（P＜0.05）；②再灌

4、注后2、4 h時，與I/R組相比，I/R+Esc組腦梗死體積縮?。≒＜0.05）；（2）腹腔給藥：①缺血前1 h，腹腔注射Esc50、100 mg/kg，與I/R組相比，I/R+Esc組腦梗死體積縮?。≒＜0.05）；②缺血前1 h、再灌注即刻腹腔注射Esc100 mg/kg，與I/R組相比，I/R+Esc組腦梗死體積縮小（P＜0.05）。
　　Western blot結(jié)果：Sham組及Esc組小鼠大腦皮層Cleaved Casp

5、ase3及Bax蛋白表達較低，腦I/R損傷24 h后小鼠腦組織Cleaved Caspase3及Bax蛋白的表達上調(diào)（P＜0.05），I/R+Esc組小鼠腦組織Cleaved Caspase3及Bax蛋白的表達較I/R組下調(diào)（P＜0.05）。Sham組小鼠大腦皮層Bcl-2蛋白含量較低，腦I/R損傷24 h后小鼠大腦皮層缺血區(qū)Bcl-2蛋白的含量上調(diào)，I/R+Esc組小鼠皮層缺血區(qū)Bcl-2蛋白的含量較I/R組進一步上調(diào)（P＜0.05）

6、。
　　結(jié)論：
　　1.側(cè)腦室注射Esc20μg對缺血75 min再灌注24 h的ICR小鼠MCAO腦I/R損傷具有保護作用，并且這種保護作用具有一定的時間窗。
　　2.缺血前1 h腹腔注射Esc50、100 mg/kg或者缺血前1 h和再灌注即刻腹腔注射Esc100 mg/kg對缺血75 min再灌注24 h的ICR小鼠MCAO腦I/R損傷具有保護作用。
　　3.缺血前1 h腹腔注射Esc100mg/kg對IC