GnRH Ⅱ在子宮內(nèi)膜異位癥的表達及對離體間質(zhì)細胞凋亡影響的研究.pdf

1、目的：研究GnRHⅡ蛋白在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達及其對離體培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞凋亡的影響。 方法：選自2007年8月至2008年4月在中南大學湘雅二醫(yī)院住院手術及病理證實，確診為子宮內(nèi)膜異位癥巧克力囊腫，取異位和在位子宮內(nèi)膜各30例作為實驗組，另選同期非子宮內(nèi)膜異位癥患者的正常子宮內(nèi)膜組織40例作為對照組。采用免疫組化SP法檢測GnRHⅡ蛋白在異位內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及正常內(nèi)膜組織中的表達情況，比較分析其表達差異性。另取30例內(nèi)異癥

2、異位及在位內(nèi)膜組織進行間質(zhì)細胞的分離、培養(yǎng)、鑒定，并以不同濃度的GnRHⅢ（0、10-10M、10-8M、10-6M）作用于這些離體培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞，采用Hoechst染色和流式細胞術檢測離體培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞的細胞凋亡的發(fā)生情況。 結(jié)果：（1）GnRHⅡ蛋白陽性表達定位于在位、異位及正常子宮內(nèi)膜腺體及間質(zhì)細胞的細胞漿，呈淺黃色、黃色、棕黃色或棕褐色。（2）GnRHⅡ蛋白在EMs異位和在位內(nèi)膜及對照組正常內(nèi)膜的表達依次

3、增強，兩兩比較差異有顯著性（P<0.05）。（3）GnRHⅡ在EMs患者的在位子宮內(nèi)膜和異位內(nèi)膜中的表達，不管是在增生期還是在分泌期都低于非EMs的子宮內(nèi)膜（P<0.05），在正常內(nèi)膜中的表達分泌期強于增生期，差異有顯著性（P<0.05）；而EMs異位內(nèi)膜和在位內(nèi)膜的分泌期和增生期表達無差異（P>0.05）。（4）離體培養(yǎng)情況下，對數(shù)生長期的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞給予不同濃度的GnRHⅡ（0、10-10M、10-8M、10-6M）干預后，采用

4、Hoechst染色對不同處理組細胞進行了細胞凋亡形態(tài)學的分析。結(jié)果顯示：不同濃度的GnRHⅡ?qū)﹄x體培養(yǎng)的在位和異位子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞可誘導凋亡發(fā)生，表現(xiàn)為核碎裂，核溶解，核固縮或凋亡小體。其凋亡率（％）分別為：（2.58±0.73，4.90±0.41），（8.72±1.59，12.30±2.13），（19.90±2.37，29.40±4.05），（36.10±2.36，52.30±5.42），兩兩比較，差異有顯著性（P<0.05），提示：

5、不同濃度的GnRHⅡ?qū)﹄x體培養(yǎng)的異位內(nèi)膜間質(zhì)細胞的凋亡率明顯高于在位（P<0.05），且呈劑量依賴性。流式細胞術檢測結(jié)果顯示：不同濃度的GnRHⅡ?qū)﹄x體培養(yǎng)的在位和異位子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞可誘導凋亡發(fā)生，其凋亡率（％）分別為：（2.31±0.26，5.40±0.39），（10.20±1.29，14.50±2.17），（25.70±3.22，36.20±4.64），（59.70±6.63，72.30±8.12），兩兩比較，差異有顯著性（P<0

6、.05），與Hoechst染色檢測的凋亡率一致。提示：不同濃度的GnRHⅡ?qū)﹄x體培養(yǎng)的異位內(nèi)膜間質(zhì)細胞的促凋亡作用明顯強于在位內(nèi)膜間質(zhì)細胞（P<0.05），且呈劑量依賴性。 結(jié)論：（1）內(nèi)源性的GnRHⅡ蛋白的低表達可能與內(nèi)異癥的發(fā)生發(fā)展有關。（2）GnRHⅡ蛋白在正常內(nèi)膜中的表達與月經(jīng)周期有關，而在EMs中無差異。（3）外源性的GnRHⅡ可能直接通過促進離體培養(yǎng)的EMs間質(zhì)細胞的細胞凋亡而達到治療內(nèi)異癥的目的，為內(nèi)異癥的新藥開