多巴胺生物傳感針的研制及應用.pdf

1、神經(jīng)遞質是哺乳動物和人類中樞神經(jīng)重要的信息傳遞物質，多巴胺作為一種重要的神經(jīng)遞質參與許多生理活動。本文研制的生物傳感器可在體監(jiān)測給藥后大鼠尾核中多巴胺濃度的變化，這對多巴胺的體內藥物分析及與其代謝異常有關的疾病的診斷和治療具有非常重要的意義。本文采用麥芽糊精修飾和靜電自組裝兩種方法制作多巴胺生物傳感針，并對傳感器性能、制作工藝以及在體測量等方面進行了研究。 1.麥芽糊精修飾的多巴胺生物傳感針的研制及應用。 取鉑絲固定于玻

2、璃毛細管內，外套不銹鋼管作為基體針。以酪氨酸酶為敏感物質，殼聚糖為載體，麥芽糊精（maltodextrin，MD）為激活劑，Nafion為抗干擾物質，制備麥芽糊精修飾的多巴胺生物傳感針。采用單因素試驗和正交實驗確定修飾條件為：在1.5％殼聚糖溶液中浸涂兩次晾干成載體膜，吸附5h，交聯(lián)4h，戊二醛濃度0.25％，給酶量0.15mg/ml，麥芽糊精10?l，固定溫度4℃，在1％Nafion溶液中浸涂兩次，每次12s。 傳感針性能測定

3、結果表明，傳感針適用pH7.2～7.6，適用溫度37℃，響應時間4min，線性范圍：5×10-7 mol/L～5×10-4mol/L，最低檢測限：5×10-7mol/L。4℃濕法保存下可連續(xù)使用6d，Na+，K+，Ca2+，NH4+等離子及抗壞血酸對測定基本無影響，重現(xiàn)性RSD＜4.5％。以研制的多巴胺傳感器對大鼠腦組織尾核進行在體測定，結果表明，給予不同劑量的美多芭，傳感器的響應時間均為10min左右，響應信號隨給藥劑量增大而增大，另

4、外，在給予相同劑量美多芭的同時添加司來吉蘭后，傳感針的響應更大，并隨司來吉蘭的給藥劑量增大而增大。達峰時間均為40min左右。 2.靜電自組裝技術制備多巴胺生物傳感針的研究及應用。 以氧分壓傳感針為基體，殼聚糖為聚陽離子，酪氨酸酶為聚陰離子，Nafion為抗干擾物質，采用靜電自組裝技術制備多巴胺生物傳感針。通過單因素試驗和正交實驗確定酶固定條件為：酶緩沖液pH7.0，殼聚糖濃度1.0％，給酶量0.15mg/ml，自組裝1

5、0次，自組裝溫度4℃，在1％Nafion溶液中浸涂兩次，每次10s。 傳感針性能測定結果表明，傳感針適用pH7.2～7.8，適用溫度37℃，響應時間3min，線性范圍：5×10-7 mol/L～5×10-4mol/L，最低檢測限：1×10-7mol/L。4℃濕法保存下可連續(xù)使用10d，選擇性良好，重現(xiàn)性RSD＜5％。在體檢測結果表明，腹腔注射低、中、高三種劑量鹽酸司來吉蘭后，尾核中多巴胺濃度的變化趨勢顯示代謝過程與藥物劑量間存在