非諾貝特對(duì)翼狀胬肉成纖維細(xì)胞的抑制作用及機(jī)制的初步探索.pdf

1、翼狀胬肉是一種眼表常見疾病，發(fā)病率高，具有慢性增殖性。發(fā)病后，局部結(jié)膜及其下的纖維組織變性增生，逐漸侵入角膜，嚴(yán)重時(shí)可覆蓋瞳孔造成失明。臨床以手術(shù)切除為主，聯(lián)合羊膜移植、自體角膜緣干細(xì)胞移植、抑制增殖眼藥水合用等可有效減少復(fù)發(fā)率。目前與翼狀胬肉發(fā)病機(jī)制有關(guān)的學(xué)說很多，但尚無定論。但大量流行病學(xué)的調(diào)查發(fā)現(xiàn)過量紫外線的照射是導(dǎo)致翼狀胬肉發(fā)病的重要因素，進(jìn)一步的研究則發(fā)現(xiàn)翼狀胬肉常伴有DNA氧化產(chǎn)物的產(chǎn)生以及炎性因子炎癥細(xì)胞的聚集。因此，目前

2、多數(shù)學(xué)者認(rèn)為翼狀胬肉的發(fā)病機(jī)制與紫外照射引起的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)有關(guān)。
　　 有研究發(fā)現(xiàn)，胬肉中存在氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)在。在氧化應(yīng)激中，NOX4和Nrf2是比較重要的兩種物質(zhì)。前者是NADPH氧化酶中的一種，對(duì)ROS的產(chǎn)生起主要作用;而Nrf2被激活后可發(fā)揮抗氧化活性，對(duì)ROS的清除有重要意義。在炎癥中，致炎因子IL6和TNFα則處于主要地位，并且已有研究證實(shí)翼狀胬肉組織中有二者的存在。
　　 非諾貝特是PPARα激動(dòng)劑

3、，研究發(fā)現(xiàn)PPARα被激活后可發(fā)揮抗炎抗氧化的作用，最近研究發(fā)現(xiàn)非諾貝特可有效治療糖尿病性視網(wǎng)膜疾病。非諾貝特可能用于其他眼表疾病，如翼狀胬肉的治療。本課題探索非諾貝特對(duì)翼狀胬肉細(xì)胞的抑制作用以及機(jī)理。
　　 在實(shí)驗(yàn)中，我們首先利用翼狀胬肉組織培養(yǎng)原代成纖維細(xì)胞(PFCs)，并給予非諾貝特觀察其作用效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，非諾貝特可有效抑制翼狀胬肉原代成纖維細(xì)胞的增殖和遷移，并呈劑量效應(yīng)關(guān)系。非諾貝特具有抗炎和抗氧化作用，其機(jī)制為非諾貝

4、特可以下調(diào)ROS生成的主要酶NOX4并上調(diào)抗氧化因子Nrf2，非諾貝特對(duì)主要致炎因子IL6和TNFα也有抑制作用。在對(duì)其作用機(jī)制的進(jìn)一步研究中發(fā)現(xiàn)，我們發(fā)現(xiàn)非諾貝特可以特異性的激動(dòng)PPARα受體。非諾貝特可以上調(diào)PPARα的蛋白表達(dá)水平， PPARα拮抗劑MK886可以阻斷非諾貝特的相關(guān)作用。而且，非諾貝特對(duì)PPARα的作用表現(xiàn)為基因轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)，在基因水平并無變化。
　　 綜上所述，我們首次發(fā)現(xiàn)了非諾貝特對(duì)翼狀胬肉原代成纖維細(xì)胞