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文檔簡介
1、蜜蜂工蜂的納氏信息素(Nasonov pheromone)作為蜜蜂的化學(xué)信息素之一,在蜂群的群體及個體協(xié)調(diào)過程中,具有重要的作用。目前對蜜蜂工蜂納氏腺的研究主要集中在西方蜜蜂(Apis mellifera)上,其分泌物的化學(xué)成分主要為(反)-檸檬醛、(順)-檸檬醛、橙花醇、香葉醇、橙花酸、香葉酸和(反,反)-法呢醇這7種萜烯類物質(zhì),而對于東方蜜蜂(Apis cerana)納氏腺分泌物的成分研究并不透徹,有文獻(xiàn)報導(dǎo)其中僅含有香葉醇、(反)
2、-檸檬醛和極微量的(順)-檸檬醛。在對納氏腺功能的研究發(fā)現(xiàn),西方蜜蜂的納氏信息素參與了認(rèn)巢、定向、采食、分蜂、婚飛等過程。但對于東方蜜蜂納氏信息素的功能的研究還不盡完善。此外,東方蜜蜂和西方蜜蜂在生物學(xué)上有較多的差異,為此,探究東方蜜蜂和西方蜜蜂納氏信息素的成分、功能及行為活性差異均有很大的研究意義。
本研究以東方蜜蜂和西方蜜蜂的納氏腺為材料,摸索最優(yōu)的納氏信息素提取方法,對納氏信息素的化學(xué)成分進(jìn)行定性和定量分析。并用單組分與
3、混合組分的納氏信息素對蜜蜂進(jìn)行生物活性測定,為進(jìn)一步研究東方蜜蜂和西方蜜蜂的納氏信息素差異甚至不同種蜜蜂之間的進(jìn)化差異提供依據(jù)。通過研究獲得的主要結(jié)論總結(jié)如下:
1.利用氣相色譜(gas chromatography,GC)分析蜜蜂納氏腺的成分,設(shè)計相應(yīng)的檢測方案。發(fā)現(xiàn)西方蜜蜂的納氏信息素除了已被報道的萜烯類物質(zhì)外,還有一些脂肪酸類物質(zhì),并且這些有機酸類物質(zhì)在東方蜜蜂的納氏腺提取物中也檢測到,然而在東方蜜蜂納氏信息素中并沒有檢
4、測到萜烯類物質(zhì)。
2.運用固相微萃取技術(shù)(solid-phase microextraction,SPME)可以大大簡化蜜蜂納氏信息素的提取。通過與標(biāo)準(zhǔn)的溶液提取方式比對,設(shè)計并優(yōu)化了SPME提取步驟,使得提取納氏信息素的種類與數(shù)量和溶液提取方式基本一致。
3.對東方蜜蜂和西方蜜蜂納氏信息素有機酸類成分進(jìn)行了鑒定,主要含有:正辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、(順)-9-十六烯酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸這1
5、0種物質(zhì)。
4.對東方蜜蜂和西方蜜蜂納氏信息素每一活性組分進(jìn)行了定量分析,結(jié)果表明:東方蜜蜂納氏信息素的正辛酸和癸酸含量比西方蜜蜂高,而肉豆蔻酸、棕櫚酸、(順)-9-十六烯酸和油酸的含量比西方蜜蜂低。在這些脂肪酸成分中,正辛酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、(順)9-十六烯酸和油酸呈現(xiàn)極顯著差異(T-test,sig=p<0.01)。
5.利用氣相色譜和觸角電位儀聯(lián)用技術(shù)(gas chromatography coupled w
6、ith electroantennographic detector,GC-EAD)分析了兩組分的電生理活性,結(jié)果表明:萜烯類的香葉醇、香葉酸和(反,反)-法呢醇均能引起工蜂明顯的觸角電位反應(yīng),而脂肪酸中僅正辛酸能引起工蜂的觸角電位反應(yīng)。
6.對納氏信息素的生物活性測定分析表明:無論是全組分還是單成分的脂肪酸,對東方蜜蜂和西方蜜蜂的行為均未起到明顯的誘導(dǎo)或疏散作用。
7.由于東方蜜蜂和西方蜜蜂納氏信息素成分的差異性,
7、單獨對脂肪酸在其他功能上的實驗發(fā)現(xiàn),死亡工蜂的尸體會釋放出脂肪酸,并且不同時間段各成分釋放的量也不同,因此這些脂肪酸可能在作為蜜蜂的尸體識別信號(necronome pheromone)參與群體的清理行為。
綜上所述,東方蜜蜂和西方蜜蜂的納氏信息素在組分上存在很大的差異,西方蜜蜂納氏信息素參與的已報道的各種行為多是萜烯類成分主要介導(dǎo)的,而東方蜜蜂不含有此類物質(zhì),卻仍有類似的行為,可能是其他腺體或者行為起作用。目前實驗表明,有機
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