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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察白細(xì)胞介素-1β(Inter le uk in-1β, I L-1β)體外作用下臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的水通道蛋白-1(aquaporins,AQP-1)mRNA轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)的差異、細(xì)胞凋亡情況和細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變,探討IL-1β在重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)毛細(xì)血管滲漏綜合征(Capillary Leak Syndrome,CLS)發(fā)生機(jī)制中的可能作用。
方法:體外培養(yǎng)臍靜
2、脈內(nèi)皮細(xì)胞,隨機(jī)分為3組:時(shí)間組(T),以含20ng/mlIL-1β的培養(yǎng)液分別培養(yǎng)3h(T1)、8h(T2)、12h(T3)和24h(T4);濃度組(C),分別以含0.2ng/ml(C1)、2ng/ml(C2)和20ng/ml(C3)IL-1β的培養(yǎng)液培養(yǎng)24h;對(duì)照組,以不含IL-1β的培養(yǎng)液培養(yǎng)24h。實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot檢測(cè)AQP-1 mRNA及蛋白表達(dá)差異,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況,電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)
3、構(gòu)的改變。
結(jié)果:與對(duì)照組相比,時(shí)間組T1~T4和濃度組C1~C3的AQP-1mRNA轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達(dá)均下降(P<0.05)。I L-1β刺激后,細(xì)胞凋亡率增高,電鏡下可見(jiàn)線粒體腫脹、空泡變性、細(xì)胞核溶解及細(xì)胞壞死,且隨著刺激時(shí)間的延長(zhǎng)或濃度的增高,這些改變更加明顯。
結(jié)論:IL-1β可導(dǎo)致AQP-1mRNA轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達(dá)降低、細(xì)胞凋亡率增高,并破壞細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu),這是血管內(nèi)皮屏障損傷的重要原因,可能與SAP毛
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