A2A受體拮抗劑(SCH442416)對(duì)體外加壓培養(yǎng)的大鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞谷氨酰胺合成酶、谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體-1的調(diào)控作用.pdf

1、目的：觀察A2AR拮抗劑對(duì)體外加壓培養(yǎng)的大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞的GS、GLAST是否具有調(diào)控作用；完善視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞的機(jī)能作用，為青光眼治療提供新的治療方向和藥物。
　　 方法：應(yīng)用血?dú)夥治龇z測(cè)不同壓力模型(0，20，40，60，80mmHg/24h)中PH值，PCO2值，PO2值。應(yīng)用GFAP、GS免疫熒光鑒定Muüler細(xì)胞。應(yīng)用Realtime-PCR，Westernblot檢測(cè)不用壓力模型(0，20，40，

2、60，80mmHg/24h)中GS、GLAST的表達(dá)情況。挑選最佳壓力組。使用0.1，1.0，10μM SCH442416處理Müller細(xì)胞。應(yīng)用Realtime-PCR，Western blot檢測(cè)在最佳壓力下不同藥物濃度組GS、GLAST的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：各壓力組(0，20，40，60，80mmHg/24h)PH值，PCO2值，PO2值間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性意義(P>0.05)。GFAP、GS免疫熒光鑒定：本次實(shí)驗(yàn)所

3、培養(yǎng)細(xì)胞90％以上為Müller細(xì)胞。Realtime-PCR，Western blot檢測(cè)：40mmHg/24h組，60mmHg/24h組，GS表達(dá)明顯升高，與空白對(duì)照組(0mmHg/24h)相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性意義(P<0.05)。40mmHg/24h組，GLAST表達(dá)明顯升高，與空白對(duì)照組(0mmHg/24h)相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性意義(P<0.05)。40mmHg/24h組作為最佳壓力組，進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。Realtime

4、-PCR，Western blot檢測(cè)：10μM SCH442416-40mmHg/24h組，GS、GLAST的表達(dá)明顯升高，分別與空白對(duì)照組(0mmHg/24h)、40 mmHg/24h組(單純加壓)相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論：1.本實(shí)驗(yàn)建立了成熟穩(wěn)定、高效的視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞的培養(yǎng)和純化方法。通過(guò)該方法可獲得較高純度和產(chǎn)量的視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞。2.本實(shí)驗(yàn)建立的新型密閉式壓力模型成功有