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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過(guò)建立檳榔堿體外代謝體系比較SD大鼠不同器官及肝臟組分檳榔堿代謝能力,探索檳榔堿主要代謝酶的分布以及代謝特征,并通過(guò)加入抑制劑以及組分提純等方法確定代謝酶。為進(jìn)一步研究檳榔堿毒性機(jī)制和代謝機(jī)制的毒理學(xué)意義提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:制備SD大鼠器官勻漿,收集血液;差速離心法分離肝亞細(xì)胞組分;利用等密度梯度離心法提純線(xiàn)粒體:建立反應(yīng)體系,采用離子對(duì)RP-HPLC法檢測(cè)檳榔堿,并結(jié)合酶抑制劑比較各器官、組分及線(xiàn)粒體提純前后檳
2、榔堿代謝能力。
結(jié)果:1.離子對(duì)RP-HPLC法檢測(cè)檳榔堿,含量與峰值呈良好線(xiàn)性關(guān)系。2.檳榔堿的代謝酶在SD大鼠體內(nèi)廣泛存在,尤其以肝臟,血液豐富。檳榔堿代謝酶分布于SD大鼠肝細(xì)胞內(nèi)各亞細(xì)胞組分。3.檳榔堿體外代謝符合酶促反應(yīng)特征,肝細(xì)胞中能代謝檳榔堿的酶主要分布于溶酶體,線(xiàn)粒體與微粒體。4.羧酸酯酶活性與一定范圍內(nèi)TPP劑量負(fù)相關(guān),微量TPP(0.5nmol/ml)即可阻斷羧酸酯酶檳榔堿代謝。
結(jié)論:1.
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