不同頻率聚焦超聲場(chǎng)下基于Span60的兩種表面活性劑微氣泡的生物學(xué)效應(yīng)研究.pdf

1、相比較于其他的各種診斷方法中，超聲診斷被證實(shí)是一種安全，簡(jiǎn)單，非侵入性且費(fèi)用低廉的影像技術(shù)。采用微氣泡作為超聲對(duì)比劑可以顯著增強(qiáng)超聲成像的效果，現(xiàn)在臨床上已經(jīng)得到廣泛的應(yīng)用。當(dāng)然除了用于增強(qiáng)超聲顯影效果外，在外加超聲場(chǎng)的作用下，微氣泡還會(huì)與細(xì)胞發(fā)生相互作用，引發(fā)多種生物學(xué)效應(yīng)，利用這些生物學(xué)效應(yīng)微氣泡可以用來(lái)作為藥物傳輸系統(tǒng)和基因轉(zhuǎn)染工具，從而提高藥物傳輸和基因轉(zhuǎn)染的效率。
　　在各種包膜(脂質(zhì)體、聚合物、表面活性劑)微氣泡中，表

2、面活性劑微氣泡的厚度是最低的，因而在超聲作用下，它最容易破裂，由此可以引發(fā)較強(qiáng)的生物學(xué)效應(yīng)，在較低強(qiáng)度的超聲作用下，可以使周?chē)?xì)胞發(fā)生穿孔甚至裂解，因而有望成為新一代高效的腫瘤抑制劑。
　　Span60、Tween80以及PEG25S都是非離子型表面活性劑，具有很好的生物相容性，廣泛用做藥物輔料和食品添加劑中，本文采用超聲空化法成功制備了基于表面活性劑Span60的兩種微氣泡，并研究了它們與SMMC-7721肝癌細(xì)胞相互作用而引發(fā)

3、的生物學(xué)效應(yīng)，具體的研究工作概述如下：
　　(1)兩種微氣泡的制備，表征。采用超聲空化法成功制備了基于表面活性劑Span60的兩種微氣泡(Span60-Tween80以及Span60-PEG25S微氣泡)，采用光鏡以及透射電鏡對(duì)其粒徑形貌進(jìn)行了表征，并對(duì)其在不同條件下的穩(wěn)定性進(jìn)行了一定的研究。
　　(2)兩種微氣泡的細(xì)胞毒性研究，超聲場(chǎng)下微氣泡破裂對(duì)細(xì)胞凋亡，周期，蛋白等的影響。三種頻率的水浸聚焦探頭(0.5MHz、1MHz

4、和3.5MHz)，與功率放大器以及函數(shù)發(fā)生器連接到一起，并自制了一個(gè)高度可調(diào)的支架，另外配備了一臺(tái)12V，3600rpm直流電機(jī)協(xié)助旋轉(zhuǎn)樣品槽，組裝成微氣泡與細(xì)胞相互作用系統(tǒng)。用CCK-8比色法檢測(cè)了不同膜材以及兩種不同的表面活性劑微氣泡對(duì)SMMC-7721細(xì)胞的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率，通過(guò)流式細(xì)胞儀研究基于聲致穿孔這一基本原理在不同條件超聲場(chǎng)下兩種表面活性劑微氣泡對(duì)細(xì)胞的凋亡、周期、蛋白的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)采用的膜材以及制備的微氣泡生物相容性良好