基于自組裝和原子力顯微鏡的藥物溶液下血清蛋白及其抗體的相互作用研究.pdf

1、基于自組裝和原子力顯微鏡的藥物溶液下血清蛋白及其抗體的相互作用研究念重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文(學(xué)術(shù)學(xué)位)學(xué)生姓名：王從周指導(dǎo)教師：王建華教授專業(yè)：藥學(xué)學(xué)科門類：理學(xué)重慶大學(xué)生物工程學(xué)院二O一二年四月重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要摘要很多人類疾病都與蛋白質(zhì)之間的結(jié)合／解離情況密切相關(guān)，因此從分子水平上研究蛋白質(zhì)之間的相互作用在生命科學(xué)領(lǐng)域具有十分重要的意義。近年來，探測(cè)和表征這些蛋白質(zhì)問的相互作用如何受Nd分子的影響，在藥物篩選以及醫(yī)學(xué)診斷中扮

2、演著越來越重要的角色。本文以牛血清白蛋白(BSA，抗原)和兔抗牛血清白蛋白(anti—BSA，抗體)為研究對(duì)象，以基于自組裝和原子力顯微鏡(AFM)的單分子力譜技術(shù)為主，表面等離子共振技術(shù)(SPR)為輔，考察了不同溶液環(huán)境下抗原／抗體間的相互作用。主要內(nèi)容如下：通過白組裝單分子層法(SAM)法進(jìn)行蛋白質(zhì)固定，應(yīng)用AFM進(jìn)行不同溶液環(huán)境下BSA和antiBSA的粘附力測(cè)試，再通過泊松分布統(tǒng)計(jì)法計(jì)算得到BSA和antiBSA單分子對(duì)在不同溶

3、液環(huán)境下的特異性作用力(E)和非特異性作用力(而)：生理溶液下R為98pN，F(xiàn)o為48pN；泰樂菌素溶液中E降至54pN；磺胺噻唑鈉溶液中凡升至90pN。利用SPR考察了不同溶液環(huán)境下BSA／antiBSA的結(jié)合／解離過程，得到了不同環(huán)境下BSA／anti—BSA的動(dòng)力學(xué)參數(shù)(結(jié)合速率k。)：生理溶液中k。為707x103MdS～；泰樂菌素溶液中k。降至334x103M‘1S～；磺胺噻唑鈉溶液中k。升至897x103M。1S～。利用AF

4、M考察了不同濃度的藥物及同一類型下類似結(jié)構(gòu)的藥物對(duì)于BSA／antiBSA間相互作用力的影響情況。以上結(jié)果表明大環(huán)類脂類抗生素由于其較大的分子空問結(jié)構(gòu)，隨著其濃度的上升會(huì)掩蓋BSA／anti—BSA間特異性結(jié)合位點(diǎn)，從而降低單分子對(duì)間的E；磺胺鈉鹽類藥物隨著其濃度的上升會(huì)增加整體溶液的離子強(qiáng)度，降低BSA／anti—BSA間的靜電排斥力，從而增加其而；喹諾酮類抗生素作為一種結(jié)構(gòu)較小的非離子型藥物，其存在和濃度對(duì)BSA／antiBSA間的