Treg細胞及Tim3負性調控因子在異基因造血干細胞移植后作用的研究.pdf

1、目的:(1)通過對高危難治惡性血液病患者異基因造血干細胞移植后輸注DC-CIK細胞中 CD4+CD25+CD127-T(Treg)細胞的檢測及功能實驗,探討DC-CIK細胞輸注物中不同比例的Treg細胞與惡性血液病患者移植后急性移植物抗宿主病(aGVHD)、復發(fā)及生存的關系。
　　(2)通過檢測異基因造血干細胞移植后患者外周血中Treg細胞的比例及Tim3在淋巴細胞亞群上的表達,探討Treg細胞、Tim3與aGVHD發(fā)生的關系。<

2、br>　　方法:(1)采用流式細胞術檢測高危難治惡性血液病患者在異基因造血干細胞移植后接受DC-CIK細胞治療的輸注物中Treg細胞百分比。
　　(2)與同期行異基因造血干細胞移植但未接受DC-CIK細胞治療的高危難治惡性血液病患者在aGVHD、復發(fā)及生存相比較。
　　(3)采用流式細胞儀分選出DC-CIK細胞中的Treg細胞,運用混合淋巴細胞反應及MTT比色法,進行DC-CIK細胞中Treg細胞體外抑制功能實驗。
　

3、　(4)采用流式細胞術檢測異基因造血干細胞移植后發(fā)生aGVHD及未發(fā)生aGVHD患者外周血中Treg細胞的比例。
　　(5)采用流式細胞術的方法檢測異基因造血干細胞移植后發(fā)生aGVHD及未發(fā)生aGVHD患者外周血中Tim3在CD4+T細胞、CD8+T細胞、CD3-CD56+細胞及CD4+CD25+T細胞上的表達。
　　結果:(1)32例高危難治惡性血液病患者在異基因造血干細胞移植后接受DC-CIK細胞治療,25例患者輸注的D

4、C-CIK細胞來源為供體,7例為異基因造血干細胞移植后受體。
　　(2)Treg/DC-CIK細胞在5％以下的為低比例表達組,共10例;Treg/DC-CIK細胞在5％-10％之間的為中比例表達組,共16例;Treg/DC-CIK細胞在10％以上的為高比例表達組,共6例。
　　(3)DC-CIK細胞中的Treg細胞與效應細胞的效靶比在1.3:1時抑制功能最強。
　　(4)異基因造血干細胞移植后接受DC-CIK細胞治療及

5、未接受DC-CIK細胞治療的高危難治惡性血液病患者從2010年12月隨訪至2013年7月1日,中位隨訪時間為13.7(2-19.7)個月。接受DC-CIK細胞治療的4/32例(12.50％)患者發(fā)生I-II度aGVHD,其中3例為低比例表達組,1例為中比例表達組;未接受DC-CIK細胞治療的10/27例(37.03％)患者發(fā)生aGVHD,其中7例發(fā)生I-II度aGVHD,3例發(fā)生III-IV度aGVHD,接受DC-CIK細胞治療的患者的

6、aGVHD的發(fā)生率及程度較未接受DC-CIK細胞的明顯降低(P<0.05);接受DC-CIK細胞治療的患者中7/32例(21.88％)復發(fā),1例為低比例表達組,3例為中比例表達組,2例為高比例表達組;未接受DC-CIK細胞治療的患者中8/27例(29.63％)復發(fā),兩組患者間的復發(fā)率無明顯的統(tǒng)計學差異(P>0.05);接受DC-CIK細胞治療及未接受DC-CIK細胞治療的患者的2年總生存率(OS)分別為70.31％VS52.37％(P<

7、0.05),2年無病生存率(DFS)分別為64.52％VS53.84％(P<0.05)。
　　(5)異基因造血干細胞移植后檢測患者外周血中Treg細胞比例顯示,aGVHD患者外周血中的Treg細胞較未發(fā)生aGVHD患者減低(P<0.05)。
　　(6)Tim3在異基因造血干細胞移植后淋巴細胞亞群表達檢測顯示, Tim3在aGVHD患者外周血CD4+T細胞、CD8+T細胞及CD4+CD25+T細胞上的表達均較未發(fā)生 aGVHD

8、患者升高(P<0.05);而Tim3在CD3-CD56+細胞上的表達,兩組間無明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
　　結論:(1)DC-CIK細胞輸注物中Treg細胞具有免疫抑制效應,異基因造血干細胞移植后輸注DC-CIK細胞可以降低aGVHD的發(fā)生,卻未明顯影響移植物抗白血病(GVL)效應,從而有望提高高危難治白血病患者的治愈率,為造血干細胞移植后細胞生物干預治療提供了一條新的途徑。
　　(2)Treg細胞在異基因造血干細胞