厄貝沙坦對STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠早期腎臟肥大的影響及其機制探討.pdf

1、目的:腎臟肥大是糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)早期特征性病理改變,與后期的腎臟纖維化密切相關(guān).腎臟局部腎素—血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensin system,RAS)的異常在DN發(fā)生發(fā)展中具有重要作用,但是其確切機制仍不明了.結(jié)締組織生長因子(connective tissue growthfactor,CTGF)是新近發(fā)現(xiàn)的一個重要的致纖維化因子,CTGF是否參與了糖尿病早期腎臟肥大?其可

2、能的機制又是什么?有關(guān)這方面的報道很少.本研究旨在探討血管緊張素Ⅱ受體1拮抗劑(angiotensinⅡ type 1 receptor antagonist,ARA)厄貝沙坦(irbesartan,Irb)對鏈脲佐菌素(streptozotosin,STZ)誘導(dǎo)的單側(cè)腎切除大鼠早期尿蛋白排泄、小球面積、體積和小管面積、腎小球毛細血管基底膜(glomerular basement membrane,GBM)、腎小管基底膜(tubular

3、 basement membrane,TBM)的改變,以及腎臟CTGF、p27kip1和α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)表達的影響,以探討厄貝沙坦腎保護作用機制.方法:將體重為180±20g的清潔級雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機分為對照(假手術(shù))組(C組)(n=32)、糖尿病腎病(DN)組(n=35)和糖尿病血管緊張素Ⅱ受體1拮抗劑Irb治療(DNI)組(50mg/kg/d)(n=39).每組再隨機分為4個亞組:1周,

4、2周,4周和 8周組,分別于糖尿病成模后1周,2周,4 周和8周處死.大鼠單側(cè)腎切除(右腎)1周后一次性腹腔注射STZ(50mg/Kg)誘導(dǎo)糖尿病模型,觀察每周血糖(BG),24小時尿量(UV),體重(BW)及處死前的24小時尿蛋白定量(24Upro),尿白蛋白排泄(24Ualb),內(nèi)生肌苷清除率(Ccr),腎重(KW),腎重/體重(KW/BW)等腎臟肥大指標的改變,應(yīng)用RY-2000計算機輔助圖像分析軟件(CMIAS)測定腎小球毛細血

5、管袢面積(A<,G>)、體積(V<,G>),近端小管面積(A<,T>),電鏡觀察8周組大鼠的GBM和TBM 厚度的改變,免疫組織化學(xué)方法(采用SP法)觀察腎皮質(zhì)CTGF、p27kip1、α-SMA表達的改變,免疫組化雙染觀察CTGF和α-SMA在腎臟皮質(zhì)共表達的情況.并分別對CTGF的表達利p27kip1的表達、A<,G>、V<,G>、A<,T>、24Upro、、24Ualb作相關(guān)分析.結(jié)論:在糖尿病早期,升高的CTGF可能介導(dǎo)了早期腎