矮牽?；ㄋ幣囵B(yǎng)再生體系的建立.pdf

1、本試驗(yàn)以五個(gè)不同基因型的矮牽牛品種為試材，在總結(jié)花蕾外部形態(tài)與小孢子發(fā)育時(shí)期關(guān)系的基礎(chǔ)上，著重對(duì)矮牽?；ㄋ幣囵B(yǎng)中的污染問題和影響矮牽?；ㄋ幣囵B(yǎng)中愈傷組織形成的主要因素如材料基因型、培養(yǎng)基中的激素種類和濃度、蔗糖濃度、活性碳濃度及低溫和高溫處理等問題進(jìn)行了系統(tǒng)的研究與探討。同時(shí)，對(duì)分化培養(yǎng)基、長(zhǎng)苗培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基進(jìn)行了篩選并對(duì)培育出的花粉植株進(jìn)行了倍性鑒定。主要結(jié)果如下： 小孢子發(fā)育時(shí)期與花蕾長(zhǎng)度沒有必然聯(lián)系，而花蕾外部形態(tài)與小

2、孢子發(fā)育時(shí)期存在一定的對(duì)應(yīng)關(guān)系。花瓣微露、瓣萼等長(zhǎng)或瓣稍長(zhǎng)、花藥綠黃色飽滿的花蕾，多數(shù)小孢子處于雙核期，為矮牽?；ㄋ幣囵B(yǎng)的最佳時(shí)期。1mol/L HCl 1min+75％酒精30sec+0.1％升汞8min對(duì)花蕾的消毒效果最好。 誘導(dǎo)培養(yǎng)基：供試的五個(gè)基因型中，材料A103沒有誘導(dǎo)出愈傷組織，其余四種基因型的愈傷組織誘導(dǎo)率相差很大，但在Nitsch+0.2mg/L 2,4-D+0.5mg/L NAA+0.2 mg/L6-BA的誘

3、導(dǎo)率均達(dá)到最高；添加9％的蔗糖有利于愈傷組織的誘導(dǎo)；適宜的活性炭濃度為0.5g/L；將花蕾在4℃下低溫預(yù)處理48～72h有助于提高愈傷組織誘導(dǎo)率；給予33℃的高溫處理24h最有利于愈傷組織的誘導(dǎo)。隨著接種密度的增大，愈傷組織的誘導(dǎo)率逐漸增加。但接種密度過大，污染機(jī)率相應(yīng)增加，故認(rèn)為適宜的接種密度為10枚/皿。 分化、長(zhǎng)苗和生根培養(yǎng)基：MS+3mg/L 6-BA為最佳的分化培養(yǎng)基，其愈傷組織分化率為40.63％，MS+0.2mg/

4、L IBA+3mg/L 6-BA的分化率也相對(duì)較高，為33.33％；培養(yǎng)基MS+KT0.5+IAA0.2長(zhǎng)苗效果最好，不僅植株健壯而且生長(zhǎng)迅速，MS+KT0.1+IAA0.2雖然植株也很健壯，但生長(zhǎng)緩慢；培養(yǎng)基1/2MS+IBA0.5最易生根，生根率達(dá)97.22％，根粗壯，適宜作根尖鑒定，1/2MS+IBA0.2生根率為92.5％，根較粗，側(cè)根多，適于移栽。 花粉植株的倍性鑒定：培育出的38株花粉植株中有37株為二倍體，1株為三