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1、組織培養(yǎng)技術(shù)被廣泛用于滿天星良種繁育,但傳統(tǒng)的組培方法有待進一步改進。在固體培養(yǎng)基成分確定的基礎(chǔ)上,應(yīng)用生物反應(yīng)器進行繁殖對大量提供組培苗具有重要意義。本試驗以滿天星莖段為試材,對滿天星常規(guī)固體增殖培養(yǎng)基的組成進行了研究,且為了改進常規(guī)組織培養(yǎng)法在生產(chǎn)滿天星組培苗時的不足,初步探索了利用生物反應(yīng)器進行滿天星增殖培養(yǎng)的可行性,并對培養(yǎng)過程中生物反應(yīng)器的幾個可控環(huán)境進行了調(diào)試。 固體培養(yǎng)基成分對滿天星增殖影響的研究結(jié)果表明:MS基本
2、培養(yǎng)基比SH、B<'85>和White基本培養(yǎng)基更有利于滿天星的增殖;含NH<,4><'+>/NO<,3><'->20/4.0 mM,總氮量90 mM的MS培養(yǎng)基加倍后能使?jié)M天星組培苗增殖率更高更健壯;與果糖和葡萄糖相比,蔗糖更有利于滿天星增殖;30g/L的蔗糖對滿天星增殖生長有促進作用,同時抑制玻璃苗的發(fā)生。 比較了生物反應(yīng)器液體培養(yǎng)和傳統(tǒng)固體培養(yǎng)對滿天星增殖的影響,發(fā)現(xiàn)在生物反應(yīng)器內(nèi)液體培養(yǎng)的每個外植體增殖個數(shù)達15.7個,
3、而固體培養(yǎng)時僅為11.6個,且不定苗的鮮物重和干物重顯著優(yōu)于固體培養(yǎng),大大縮短了生長周期。因此利用生物反應(yīng)器繁殖滿天星不定苗是一種有效可行的方法。 采用2.5L柱狀氣升式生物反應(yīng)器對其內(nèi)部可控環(huán)境進行了調(diào)試,認為接種密度35個比接種密度25個和45個更有利于滿天星的增殖,既充分利用了空間又獲得了大量健壯的不定苗;滿天星增殖采用生物反應(yīng)器培養(yǎng)時4800 Lux光照強度對滿天星增殖培養(yǎng)最為有效;反應(yīng)器底部采用孔隙15μm的多孔噴頭,
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