R-（+）-型維拉帕米逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥及其分子機(jī)理研究.pdf

1、目的：探討右旋維拉帕米(R-VPM)(組成維拉帕米的光學(xué)異構(gòu)體之一)的逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥效應(yīng)及初步機(jī)理。 方法：用不斷遞增阿霉素(ADK)濃度梯度的辦法，將敏感細(xì)胞株MCF-7和HL-60培養(yǎng)成為耐藥株MCF-7/ADR和HL-60/ADR。用化學(xué)拆分的方法，合成手性選擇劑S-(+)-BNP來(lái)拆分(±)-VPM得到R-VPM。MTT法測(cè)定IC<,50>來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞水平上逆轉(zhuǎn)腫瘤MDR效應(yīng)，裸鼠移植瘤實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)體內(nèi)逆轉(zhuǎn)MDR效應(yīng)，小鼠急

2、性毒性實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)安全性。流式細(xì)胞儀測(cè)定R-VPM對(duì)細(xì)胞內(nèi)阿霉素蓄積的影響，RT-PCR測(cè)定相關(guān)耐藥基因的變化。 結(jié)果：成功培養(yǎng)兩株耐藥株MCF-7/ADR和HL-60/ADR，與敏感株相比，耐藥倍數(shù)分別為59.75倍和7.34倍。自主合成手性選擇劑S-(+)-BNP來(lái)拆分(±)-VPM，制備了R-VPM，并進(jìn)行旋光，核磁，元素分析等確定了其結(jié)構(gòu)和純度。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，低劑量的R-VPM合用ADR時(shí)即可發(fā)揮增敏作用(MCF-F/ADR為

3、0.5-5 μg/ml,HL-60/ADR為2-12μg/ml)，在荷瘤裸鼠中，ADR合用小劑量的R-VPM(30mg·kg<'-1>·d<'-1>，ip)時(shí)，與對(duì)照組和ADR組相比，能最大程度的抑制裸鼠的體重降低和腫瘤生長(zhǎng)。R-VPM昆明小鼠一次性灌胃LD<,50>值為(857.36mg．kg<'-1>)明顯高于唱VPM(134.38mg．kg<'-1>)。在MCF-7/ADR和HL-60/ADR的實(shí)驗(yàn)中，ADR合用0-2.5μ或0-