五肽化合物PLNPK對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡的治療作用及機(jī)理研究.pdf

1、目的： 研究五肽化合物PLNPK對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemiclupuserythematosus，SLE)的治療作用，并初步探討其可能的作用機(jī)制。 方法： 1.建立小鼠SLE模型，隨機(jī)分為：PLNPK組(100、200、400μg/kg/d)、生理鹽水組，并設(shè)立正常對(duì)照組，檢測(cè)PLNPK對(duì)各組小鼠尿蛋白、腎指數(shù)、血清白蛋白(ALB)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)的水平的

2、影響；HE染色觀察PLNPK對(duì)SLE小鼠腎臟病理改變的影響；透射電鏡觀察PLNPK對(duì)SLE小鼠腎臟超微結(jié)構(gòu)改變的影響；免疫熒光觀察PLNPK對(duì)SLE小鼠腎臟IgG沉積的影響；ELISA法檢測(cè)PLNPK對(duì)SLE小鼠血清中抗dsDNA抗體和抗組蛋白(histone)抗體水平的影響。 2.應(yīng)用MTS法觀察PLNPK對(duì)SLE小鼠T淋巴細(xì)胞增殖的影響；CD3免疫組化方法觀察PLNPK對(duì)SLE小鼠腎臟T細(xì)胞浸潤(rùn)的影響；CD25免疫組化方法觀

3、察PLNPK對(duì)SLE小鼠腎臟T細(xì)胞活化的影響；應(yīng)用MTS法觀察PLNPK體外對(duì)JurkatT細(xì)胞增殖的影響；應(yīng)用WesternBlot方法，觀察PLNPK(0.8、1.6mg/ml)對(duì)JurkatT細(xì)胞Zap-70蛋白磷酸化的影響；觀察PLNPK對(duì)SLE小鼠脾細(xì)胞Zap-70蛋白磷酸化的影響。 結(jié)果： 1.PLNPK(100、200、400μg/kg/d)均能夠降低SLE小鼠尿蛋白和腎指數(shù)(P<0.05)，能夠降低SLE

4、小鼠TC、TG水平(P<0.05)；PLNPK(100、200μg/kg/d)能夠升高SLE小鼠血清ALB，降低SLE小鼠血清BUN水平(P<0.05)，能夠降低SLE小鼠血清抗dsDNA抗體和抗histone抗體水平(P<0.05)；PLNPK(100μg/kg/d)能夠降低SLE小鼠血清Cr水平(P<0.05)；HE染色顯示PLNPK能夠減輕腎小球系膜細(xì)胞增生，減少蛋白管型形成，減輕腎間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤(rùn)等病理改變；免疫熒光染色顯示PLN

5、PK減輕腎臟IgG的沉積；透射電鏡顯示PLNPK能夠減輕電子致密物的廣泛沉積，減輕基底膜增厚、足突融合，減少腎間質(zhì)淋巴、單核細(xì)胞浸潤(rùn)。 2.PLNPK(100、200μg/kg/d)能夠抑制ConA誘導(dǎo)的SLE小鼠體內(nèi)T淋巴細(xì)胞非特異性增殖(P<0.05)；PLNPK能夠減少腎臟組織CD3+T細(xì)胞浸潤(rùn)，減少CD25+T細(xì)胞數(shù)量；PLNPK(0.8、1.6、3.2mg/ml)體外能夠抑制T細(xì)胞非特異性增殖(P<0.05)。West

6、ernBlot結(jié)果顯示，PLNPK(0.8、1.6mg/ml)能夠抑制體外培養(yǎng)JurkatT細(xì)胞Zap-70蛋白磷酸化的水平，與對(duì)照組比較，有顯著性差異(P<0.05)；PLNPK(100、200、400μg/kg/d)能明顯減少SLE小鼠脾細(xì)胞Zap-70蛋白磷酸化的水平，與對(duì)照組比較，有顯著性差異(P<0.05)。 結(jié)論： PLNPK對(duì)小鼠SLE具有治療作用，PLNPK能夠減少SLE小鼠腎臟功能損傷，降低自身抗體水平