酶法提取茄尼醇及有機體系中酵母轉(zhuǎn)化茄尼醇產(chǎn)CoQ-,10-的研究.pdf

1、粟酒裂殖酵母S.promb2.1794(Schizosaccharomyce.spromb)具有轉(zhuǎn)化底物茄尼醇合成輔酶Q10的能力。本論文在前面研究的基礎上，主要探討了茄尼醇的酶法提取及有機體系中S.promb2.1794(Schizosaccharomyce.spromb)轉(zhuǎn)化底物茄尼醇合成輔酶Q10的工藝過程，并對其轉(zhuǎn)化機理進行了初步的分析。 研究結果表明：初始pH值4.0，濃度2.5％(v/v)，45℃下利用Viscozy

2、meL復合酶對煙末進行降解預處理，作用6個小時，茄尼醇提取率與粗品純度分別達2.172％和32.93％，其指標優(yōu)于其它預處理方式；經(jīng)精制以后純度達92.83％，可用作輔酶Q10、維生素K2等生物合成的中間體，有較高工業(yè)應用價值。 鑒于茄尼醇和輔酶Q10的水不溶性，構建了有機轉(zhuǎn)化體系：異丙醇和pH5.0、0.1mol/L的磷酸緩沖液按2∶8(v/v)比例組成轉(zhuǎn)化體系，菌體添加量為0.5％(w/v)，底物添加濃度為500mg/L，3

3、0℃下220r/m轉(zhuǎn)化8h，輔酶Q10產(chǎn)量為91.04mg/L發(fā)酵液，單位細胞內(nèi)輔酶Q10產(chǎn)量為3.726mg/g細胞，相對空白提高了203.4％，相對水相體系中輔酶Q10產(chǎn)量提高了81.24％。 預實驗的基礎上，選用丙二醇作為細胞通透劑，結果發(fā)現(xiàn)，適當濃度的有機溶劑通過使細胞膜形成可逆的小孔有效提高細胞膜通透性，但是濃度過高，導致了一定的相毒性，使得細胞活性下降甚至失活，并確定了合適的有機溶劑作用條件。 茄尼醇作為輔酶