山東漢族人群IL-12B基因和ADAM33基因多態(tài)性與慢性阻塞性肺病的相關(guān)性研究.pdf

1、人體內(nèi)的IL-12主要由抗原遞呈細(xì)胞（如單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞）及B細(xì)胞產(chǎn)生，是一種重要的致炎細(xì)胞因子，分子量為70KD，由40KD（p40）和35KD（p35）兩條多肽鏈組成。最近有研究發(fā)現(xiàn)IFN-γ可能誘導(dǎo)細(xì)胞趨化因子CXCL10的表達(dá)，抑制分泌型白細(xì)胞蛋白酶抑制劑的產(chǎn)生，促進(jìn)慢性阻塞性肺病（COPD）氣道炎癥和肺氣腫的過程。而IFN-γ可促進(jìn)IL-12的產(chǎn)生，兩者之間可通過正反饋途徑，在調(diào)節(jié)Th亞群分化上產(chǎn)生協(xié)同作用。IL

2、-12B位于染色體5q31-q33，編碼p40，全長(zhǎng)16kb，在遺傳學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)該染色體區(qū)域與某些呼吸系統(tǒng)疾病存在相關(guān)性。ADAM33是近年來新發(fā)現(xiàn)的解整合素-金屬蛋白酶（ADAM）家族成員之一。ADAM33定位于第20號(hào)染色體短臂13號(hào)位（20 p13），主要與氣道上皮細(xì)胞損傷后的修復(fù)有關(guān)，此基因主要在肺的平滑肌細(xì)胞、成肌纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞表達(dá)。在氣道上皮細(xì)胞、炎性細(xì)胞及免疫細(xì)胞中不表達(dá)。當(dāng)ADAM33活性改變時(shí)，可能引起氣道平滑肌

3、細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的功能改變，因此認(rèn)為ADAM33基因可能與小氣道重塑，氣道高反應(yīng)性及炎癥等有關(guān)。因此，IL-12B基因及ADAM33基因?qū)OPD的發(fā)生發(fā)展可能起了重要的作用，但是目前在山東漢族人群內(nèi)尚未有IL-12B基因及ADAM33基因多態(tài)性與COPD的相關(guān)性進(jìn)行的研究。 [研究目的]： 利用病例-對(duì)照研究方法探討IL-12B基因及ADAM33基因多態(tài)性與山東漢族人群慢性阻塞性肺病之間的相關(guān)性，尋找山東漢族人群COP

4、D發(fā)病的易感基因，為COPD高危人群的篩選、早期預(yù)防和臨床治療提供理論依據(jù)。 [研究方法]： 1.COPD組與對(duì)照組樣本收集：在山東漢族人群中收集COPD患者及正常對(duì)照血樣并提取基因組DNA。所收集的COPD患者均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)2007年制訂的慢性阻塞性肺病診斷標(biāo)準(zhǔn)；同期健康體檢者作為對(duì)照組。所有受試對(duì)象均排除支氣管擴(kuò)張、肺結(jié)核、肺部腫塊、肺間質(zhì)纖維化、胸部手術(shù)等呼吸系統(tǒng)病史及心臟病等其他疾病，經(jīng)過詳細(xì)的病史

5、調(diào)查和體格檢查，并進(jìn)行胸部X檢查和肺功能測(cè)定。 2.基因分型，基因型及等位基因頻率統(tǒng)計(jì)：利用適宜的基因分型方法在COPD組與對(duì)照組所有個(gè)體中對(duì)多態(tài)位點(diǎn)進(jìn)行基因型分析，并采用了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)（PCR-RFLP）方法對(duì)IL-12B基因1188A/C位點(diǎn)及ADAM33基因T1位點(diǎn)進(jìn)行分型。根據(jù)瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果確定個(gè)體基因型，統(tǒng)計(jì)出病例組與對(duì)照組中的基因型頻率及等位基因頻率。 3.Hardy-Weinber

6、g平衡吻合度檢驗(yàn)：根據(jù)Hardy-Weinberg平衡定律計(jì)算多態(tài)位點(diǎn)在COPD組和對(duì)照組中的預(yù)期基因型頻率，利用卡方檢驗(yàn)比較觀察到的基因型頻率與預(yù)期基因型頻率間的差異，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以確定所選取的COPD組與對(duì)照組樣本是否具有群體代表性。 4.基因型與等位基因分布差異檢測(cè)：利用卡方檢驗(yàn)比較各多態(tài)位點(diǎn)在COPD組與對(duì)照組間的基因型頻率及等位基因頻率差異，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。若多態(tài)位點(diǎn)的基

7、因型頻率及等位基因頻率在組間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說明該多態(tài)位點(diǎn)與COPD具有相關(guān)性，反之則無相關(guān)性。 [結(jié)果]： 1.IL-12B基因1188A/C多態(tài)位點(diǎn)AA、AC、CC基因型頻率在病例組中分別為0.3333、0.4784和0.1883，在對(duì)照組中分別為0.3573、0.4756和0.1671，A和C等位基因型的頻率在病例組中分別為0.5725和0.4275，在對(duì)照組分別為0.5951和0.4049，該位點(diǎn)基因型和等位基因

8、型分布在病例組與對(duì)照組P值分別為0.689，0.389，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.ADAM33基因T1位點(diǎn)在中國(guó)山東漢族人群中具有多態(tài)性，在COPD組與對(duì)照組中處于遺傳平衡狀態(tài)，其基因型、等位基因頻率在COPD組與對(duì)照組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.117，P=0.090）。 [結(jié)論]： 1.IL-12B基因1188A/C位點(diǎn)多態(tài)與山東漢族人群慢性阻塞性肺病無相關(guān)性。 2.ADAM33基因T1位點(diǎn)與中國(guó)山東