不同頻率間歇低氧誘發(fā)大鼠高血壓機(jī)制的研究及抗氧化劑Tempol干預(yù)效果分析.pdf

1、研究目的：
　　阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征(ObsructiveSleepApneaSyndrome，OSAS)是常見的睡眠障礙疾病，其損傷的核心因素是缺氧.再氧合形成的慢性間歇低氧。大量流行病學(xué)研究表明，OSAS與高血壓密切相關(guān)。然而，OSAS合并高血壓的發(fā)病機(jī)制至今仍不清楚。血管內(nèi)皮功能障礙與交感神經(jīng)興奮性增強(qiáng)這兩種機(jī)制可能參與其中。同時(shí)，OSAS是一種氧化應(yīng)激性疾病。因此，是否OSAS可能通過(guò)介導(dǎo)機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)，產(chǎn)生大量RO

2、S，導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能障礙和交感神經(jīng)異常興奮，最終引起高血壓的發(fā)生，這需要進(jìn)一步的研究。另外，以往研究多為低氧時(shí)間及程度對(duì)血壓的影響，少有不同低氧頻率下血壓的變化研究。鑒于此我們?cè)O(shè)計(jì)了本實(shí)驗(yàn)，通過(guò)在不同頻率的間歇低氧條件下測(cè)定大鼠血清血管活性物質(zhì)和兒茶酚胺的含量變化，以此反映血管內(nèi)皮功能與交感神經(jīng)興奮性，以及高血壓的發(fā)病情況，探討CIH相關(guān)性高血壓發(fā)生的可能作用機(jī)制，觀察不同時(shí)段給予抗氧化劑Tempol干預(yù)效果，為臨床預(yù)防和治療OSAS相

3、關(guān)性高血壓提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)支持。
　　研究?jī)?nèi)容：
　　1.不同頻率慢性間歇低氧條件下大鼠血管內(nèi)皮功能及交感神經(jīng)興奮性的研究
　　2.抗氧化劑Tempol對(duì)慢性間歇低氧條件下大鼠血管內(nèi)皮功能及交感神經(jīng)興奮性的干預(yù)作用
　　實(shí)驗(yàn)方法：
　　實(shí)驗(yàn)分為兩部分，第一部分利用計(jì)算機(jī)控制裝置改變輸送進(jìn)大鼠飼養(yǎng)箱內(nèi)的氣體含量，制造氧濃度為5％，間歇低氧頻率分別為10次/小時(shí)，20次/小時(shí)，30次/小時(shí)，40次/小時(shí)的間歇低氧環(huán)

4、境，建立大鼠不同頻率間歇低氧模型。Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為5組，每組8只，包括個(gè)常氧對(duì)照組(NC組)和4組不同間歇低氧頻率組，即10次/h間歇低氧組(IH10組)、20次/h間歇低氧組(IH20組)、30次/h間歇低氧組(IH30組)、40次/h間歇低氧組(IH40組)。第二部分分組包括第一部分的常氧對(duì)照組(NC組)以及30次/h間歇低氧組(IH組)，同時(shí)增設(shè)30次/h間歇低氧條件下Tempol干預(yù)組及其對(duì)照組32只大鼠，每組8只，

5、共4組，即暴露開始當(dāng)天Tempol腹腔注射干預(yù)組(IHT1組)與NS.對(duì)照組(IHN1組)，暴露開始后第29天Tempol干預(yù)組(IHT2組)與NS.對(duì)照組(IHN2組)。通過(guò)無(wú)創(chuàng)鼠尾套管法測(cè)定實(shí)驗(yàn)前和每周實(shí)驗(yàn)后大鼠動(dòng)脈收縮壓(SBP)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后測(cè)定各組大鼠血清一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素(ET-1)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)、去甲腎上腺素(NE)和腎上腺素(E)含量以及血清和腎上腺組織勻漿中丙二醛(MDA)含量。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)

6、果：
　　第一部分：
　　1.各組大鼠實(shí)驗(yàn)前SBP無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。隨著暴露時(shí)間延長(zhǎng)，各IH組大鼠SBP逐漸升高，至6周時(shí)，各IH組SBP較NC組和實(shí)驗(yàn)前自身水平均顯著升高(P<0.05或P<0.01)。不同頻率IH之間比較存在著有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=9.213，P<0.05)，SBP隨著頻率的增加而升高，但是當(dāng)頻率達(dá)到40次/時(shí)，較IH30組沒(méi)有呈現(xiàn)進(jìn)一步升高的趨勢(shì)。NC組SBP各時(shí)間段較實(shí)驗(yàn)前自身比較無(wú)顯著變化。
　　2.

7、各實(shí)驗(yàn)組血清ET-1(F=22.080，P<0.01)、NO(F=19.369，P<0.01)和eNOS(F=14.325，P<0.01)水平不同，均存在著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。各IH組較NC組血清ET-1水平顯著增高(P<0.05或P<0.01)，eNOS、NO水平顯著降低(均P<0.01)。隨著間歇低氧頻率的增加，ET-1水平逐漸升高，eNOS、NO水平逐漸減低。IH40組與IH30組相比，ET-1水平有升高趨勢(shì)，eNOS、NO水平有降低趨勢(shì)

8、，但各指標(biāo)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。血清ET-1水平與第6周SBP呈顯著正相關(guān)(r=0.659，P=0.000)，NO水平與6周SBP呈負(fù)相關(guān)(r=-0.580，P=0.000)
　　3.各組之間血清NE(F=13.136，P<0.01)和E(F=20.877，P<0.01)含量均存在著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各IH組NE和E含量較NC組比較明顯增加(P<0.05或P<0.01)。隨著低氧頻率的增加，NE和E的含量逐漸遞增。與IH30組相比，IH40組

9、有升高趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。血清NE、E水平與第6周SBP呈正相關(guān)(r=0.542，P=0.000；r=0.540，P=0.000)。
　　第二部分：
　　1.各組大鼠實(shí)驗(yàn)前SBP無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。隨著實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)，IH組與2組NS干預(yù)組大鼠SBP逐漸升高(P<0.05或P<0.01)，兩兩比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)暴露后第29天予以Tempol干預(yù)即IHT2組SBP明顯低于相應(yīng)NS對(duì)照組(P<0.05)，但仍高于NC組(P<0.0

10、5)及實(shí)驗(yàn)前水平(P<0.05)；實(shí)驗(yàn)前予以Tempol干預(yù)組即IHT1組大鼠SBP沒(méi)有隨時(shí)間延長(zhǎng)出現(xiàn)升高趨勢(shì)，與實(shí)驗(yàn)前自身水平及NC組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，SBP顯著低于IHT2組(P<0.01)。
　　2.各IH組之間血清ET-1(F=25.681，P<0.01)、NE(F=14.769，P<0.01)、E(F=28.017，P<0.01)、NO(F=19.28l，P<0.01)、eNOS(F=22.184，P<0.01)均存在著統(tǒng)計(jì)

11、學(xué)意義。Tempol干預(yù)組較相應(yīng)NS對(duì)照組相比，ET-1和NE、E水平顯著降低(P<0.05或P<0.01)，NO、eNOS水平顯著升高(P<0.05或P<0.01)。其中，IHT1組與IHT2組相比，ET-1和NE、E水平下降更明顯(均P<0.01)，NO、eNOS水平更高(均P<0.01)，且與NC組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IHT2組ET-1、NE、E水平仍高于NC組(P<0.01)，NO、eNOS仍較其降低(均P<0.01)。IH組與IHN

12、1、IHN2組比較各指標(biāo)無(wú)差異。
　　3.各IH組之間血清MDA(F=14.868，P<0.01)以及腎上腺組織中MDA(F=13.649，P<0.01)均存在著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IH組與IHN1組、IHN2組相比較，各指標(biāo)均沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Tempol干預(yù)的2組IH組即IHT1組與IHT2組較相應(yīng)NS對(duì)照組相比，血清及腎上腺組織MDA水平顯著降低(P<0.05或P<0.01)。其中，IHT1組較IHT2組下降更明顯(均P<0.01)，

13、與NC組比較均沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。IHT2組其水平均仍高于較NC組，存在著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.01)。
　　結(jié)論：
　　1.慢性間歇低氧可以引起血壓的升高，提示長(zhǎng)期CIH可能是OSAS并發(fā)高血壓的重要原因之一。在一定間歇低氧頻率內(nèi)，血壓升高的程度隨著頻率的增加而增加。
　　2.慢性間歇低氧可引起血管內(nèi)皮功能障礙和交感神經(jīng)興奮性增強(qiáng)，這可能是CIH相關(guān)性高血壓發(fā)生的兩條重要途徑。同樣，在一定的間歇低氧頻率內(nèi)，頻率越高，血管