硫化氫對大鼠蝮蛇毒急性肺損傷肺泡表面活性物質(zhì)形成的影響.pdf

1、目的：
　　觀察增加或減少外源性 H2S的生成是否影響蝮蛇毒致急性肺損傷中肺泡表面活性物質(zhì)的變化，探究H2S對蝮蛇毒致大鼠ALI的作用機制。
　　方法：
　　1.分組：健康成年雄性SD大鼠(200±20g)共36只，隨機分為6組，每組6只，分別為I組生理鹽水對照組，II組蝮蛇毒素組(1.5mg/kg)，III組低劑量硫氫化鈉(sodium hydrosulfide，NaHS)組(蝮蛇毒+NaHS0.78mg/kg)，I

2、V組中劑量硫氫化鈉組(蝮蛇毒+NaHS1.56mg/kg)，V組高劑量硫氫化鈉組(蝮蛇毒+NaHS3.12mg/kg)，VI組CSE抑制劑L-炔丙基甘氨酸(PPG)處理組(蝮蛇毒素+PPG30mg/kg)。
　　2.方法：將生理鹽水和蝮蛇毒素分別腹腔注射給 I組和剩余組，3小時后各組再分別腹腔注射生理鹽水、低中高劑量硫氫化鈉和L-炔丙基甘氨酸。蝮蛇毒素注射6小時后收集肺泡灌洗液(BALF)和相應(yīng)的肺組織標(biāo)本，然后處死大鼠。使用光學(xué)

3、顯微鏡對各組肺組織的病理學(xué)改變進(jìn)行觀察并對其進(jìn)行肺損傷病理評分(HE染色)；測定肺組織中SP-A、B、C mRNA基因表達(dá)的變化(RT-PCR法)；測定各組大鼠BALF中總蛋白(TP)(BCA法)及總磷脂(TPL)含量(比色法)的變化。
　　結(jié)果：
　　1.肺組織病理學(xué)改變
　　（1）大體觀：I組肺組織肉眼觀大致正常，呈粉紅色，質(zhì)軟，表面光滑，無明顯出血點和水腫。II組肺組織表面散在點片狀出血灶，充血水腫明顯。III~

4、V組肺組織充血水腫較II組減輕，尤以V組明顯。VI組肺損傷程度最嚴(yán)重，肺組織外觀呈暗紅色，表面可見大片出血灶。
　?。?）光鏡下觀：I組肺組織結(jié)構(gòu)正常，肺泡無水腫及透明膜形成，肺間質(zhì)沒有增寬，肺泡腔及肺間質(zhì)未見紅細(xì)胞漏出及炎癥細(xì)胞侵潤，無肺不張。與I組相比，II組肺組織結(jié)構(gòu)被損壞，可見肺泡塌陷，肺泡間隔增寬，大量炎性細(xì)胞浸潤，部分肺泡還有透明膜形成，IQA顯著升高(P<0.01)。與II組相比，III組肺損傷未見明顯改善(P>0.

5、05)；IV、V組可見肺損傷情況減輕，IQA下降(P<0.01)，但與I組比仍有明顯肺損傷(P<0.01)；與II組相比，VI組肺損傷明顯加重，肺泡塌陷，廣泛透明膜形成，伴有肺不張，IQA升高(P<0.01)。
　　2.肺組織中SP-A、SP-B和SP-C mRNA基因表達(dá)水平變化
　　與I組比較，II組肺組織中SP-A、SP-B和SP-C mRNA基因表達(dá)均明顯降低，兩組間比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。與II組比較，I

6、II組肺組織SP-A、SP-B、SP-C mRNA基因表達(dá)升高不顯著(P>0.05)；IV、V組肺組織中SP-A、SP-B、SP-C mRNA基因表達(dá)均升高(P<0.01)；VI組肺組織SP-A、SP-B、SP-C mRNA基因表達(dá)均有明顯降低(P<0.05)，有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3.肺泡灌洗液中TP和TPL的水平變化
　　與I組比較，II組BALF中TP含量明顯升高(P<0.01)，TPL含量明顯降低(P<0.01)。與I

7、I組比較，IV、V組BALF中TP含量明顯降低(P<0.05)，TPL含量明顯升高(P<0.05)。與II組比較， VI組BALF中TP含量明顯升高， TPL含量明顯降低，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
　　結(jié)論：
　　1.給予 NaHS能使SP-A、SP-B和SP-C mRNA的基因表達(dá)增強， TP含量降低和TPL含量提高，肺組織病理評分降低，從而減輕大鼠的肺損傷程度。而給予 PPG能抑制SP-A、SP-B和SP-C mR