Smad7基因在細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過(guò)程中的作用研究.pdf

1、 本文首先探討Smad7基因的小分子干擾RNA(siRNAs)是否能抑制基因的表達(dá)。本文利用RNA干擾技術(shù)，設(shè)計(jì)并合成了針對(duì)Smad7基因的siRNAs，用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法瞬時(shí)轉(zhuǎn)染BEP2D和BERP35T2細(xì)胞，用Northern blot法檢測(cè)RNAi效應(yīng)；同時(shí)設(shè)計(jì)并合成了綠色熒光蛋白(GFP)的siRNAs，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白的BERP35T2細(xì)胞，檢測(cè)熒光強(qiáng)度有無(wú)改變。結(jié)果：RNA干擾技術(shù)能高效抑制Smad7基因的表達(dá)

2、，為進(jìn)一步研究Smad7基因功能及TGF-β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路奠定了基礎(chǔ)。然后本文探討了Smad7基因沉默對(duì)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過(guò)程的影響。方法：對(duì)Smad7基因沉默的BEP2D和BERP35T2細(xì)胞系，用MTT法檢測(cè)Smad7基因沉默后對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響和對(duì)TGF-β介導(dǎo)的生長(zhǎng)抑制效應(yīng)的影響，并用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)Smad7基因沉默后對(duì)細(xì)胞凋亡的影響。研究表明:Smad7基因沉默后，其對(duì)TGF-β信號(hào)通路的抑制作用消失，TGF-β介導(dǎo)的生長(zhǎng)抑制作用