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1、納米技術(shù)和生物技術(shù)是21世紀(jì)的兩大熱門(mén)領(lǐng)域,在這兩者之間存在著許多技術(shù)交叉。其中,納米探針技術(shù)和傳感技術(shù)就是納米技術(shù)、生物技術(shù)與探針技術(shù)和傳感技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物,已經(jīng)引起了人們的廣泛關(guān)注。納米材料是指在三維空間中至少有一維空間的尺度在1 nm ~ 100 nm之間的物質(zhì)。具有獨(dú)特的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì),如表面效應(yīng)、微尺寸效應(yīng)、量子效應(yīng)和宏觀量子隧道效應(yīng)等,呈現(xiàn)出常規(guī)材料不具備的優(yōu)越性能。將納米材料引入生物探針和傳感領(lǐng)域后,如何利用納米材料構(gòu)
2、建納米粒子探針和傳感器、提高分析測(cè)定的靈敏度、穩(wěn)定性和其它性能,建立不同分析對(duì)象的分析方法,使其在實(shí)際應(yīng)用中真正得到更好和更廣泛的應(yīng)用,仍然是存在的一個(gè)問(wèn)題。免疫分析是利用抗原一抗體特異性反應(yīng)來(lái)測(cè)定痕量物質(zhì)的一種高靈敏度、高選擇性的方法。納米材料的介入為免疫分析的發(fā)展提供了無(wú)窮的想象空間,可把免疫分析方法的性能提高到新的水平,使其不僅檢測(cè)的速度快、精度高、可靠性好,還能實(shí)現(xiàn)多功能化和選擇檢測(cè)。
本論文利用量子點(diǎn)的獨(dú)特光學(xué)性
3、質(zhì)構(gòu)建熒光探針、利用納米金的比表面積大,吸附力強(qiáng)等性質(zhì)構(gòu)建免疫傳感器,將它們應(yīng)用于熒光免疫分析、電化學(xué)免疫分析等方法中,結(jié)果表明納米粒子大大提高了免疫分析方法的選擇性和靈敏度。
本論文包括以下內(nèi)容:
第一章:就免疫分析技術(shù),納米粒子量子點(diǎn)的合成、在生物化學(xué)分析中的應(yīng)用及納米金技術(shù)在免疫分析的應(yīng)用及發(fā)展趨勢(shì)作一概述。
第二章:探討了納米熒光磁性顆粒Fe3O4/CdTe的合成與應(yīng)用:采用化學(xué)共沉淀法
4、制備Fe3O4 納米顆粒,并用天冬氨酸對(duì)其表面進(jìn)行修飾,通過(guò)天冬氨酸與Fe3O4 納米顆粒之間的化學(xué)作用,使Fe3O4 納米顆粒表面帶上功能性基團(tuán)氨基,利用EDC和NHS 作為連接試劑,合成了Fe3O4/CdTe 熒光磁性納米顆粒。對(duì)該納米粒子進(jìn)行了熒光、紫外、XRD、電鏡、磁性等性能的系列表征。結(jié)果表明,該納米粒子既具有一定的磁性功能,又具有較好的熒光特性。在油相中合成了穩(wěn)定的CdSe/CdS納米晶,并且通過(guò)巰基乙酸為穩(wěn)定劑和修飾劑實(shí)
5、現(xiàn)水溶性量子點(diǎn)的制備。該量子點(diǎn)用于以下分析。
第三章:首次利用水溶性CdSe/CdS量子點(diǎn)作為熒光探針,金磁微粒作為固載相固定上瘦肉精抗體,利用免疫分析競(jìng)爭(zhēng)法原理,實(shí)現(xiàn)了較低下線地檢測(cè)豬肉中的瘦肉精的目的。該方法對(duì)瘦肉精檢測(cè)的線性范圍是0.50 ~ 20000.00 ppb,線性相關(guān)系數(shù)為0.992,檢出限為0.50 pg·mL-1。在本研究中,利用量子點(diǎn)優(yōu)良的熒光特性和金磁微粒的對(duì)生物大分子的固載以及磁性分離等性質(zhì),并結(jié)
6、合免疫分析的特異性識(shí)別,建立了測(cè)定痕量物質(zhì)的一種高靈敏度、高選擇性的方法,并有望將此檢測(cè)方法用于其它小分子有害物質(zhì)的檢測(cè)中。
第四章:利用水溶性CdSe/CdS量子點(diǎn)作為熒光探針,金磁微粒作為固載相固定上氫化可的松抗體,利用免疫競(jìng)爭(zhēng)法原理,實(shí)現(xiàn)了較低下線地檢測(cè)化妝品中的氫化可的松的目的。該方法對(duì)氫化可的松檢測(cè)的線性范圍是0.50 ~ 15000.00 ppb,線性相關(guān)系數(shù)為0.994,檢出限為0.50 pg·mL-1。
7、r> 第五章:利用水溶性CdSe/CdS量子點(diǎn)作為熒光探針,酶標(biāo)板作為固載相,根據(jù)免疫分析競(jìng)爭(zhēng)法原理,實(shí)現(xiàn)了較寬的檢測(cè)范圍,較低的檢測(cè)下限檢測(cè)化妝品中的雌三醇的目的。該方法對(duì)雌三醇的檢測(cè)的線性范圍是1.00 pg.mL-1 ~ 100.00 ng.mL-1,線性相關(guān)系數(shù)為0.996,檢出限為1.00 pg.mL-1。納米金的合成及對(duì)電化學(xué)免疫傳感器信號(hào)的增強(qiáng)作用:以下兩章主要利用具有強(qiáng)吸附效應(yīng)的納米金顆粒、殼聚糖的生物相容性、復(fù)合
8、納米材料聚酰胺-胺(樹(shù)狀大分子)的高枝化度、單分散性、分子中有大量的含N官能團(tuán)和端基官能團(tuán),抗體(抗原)固定在不同的基體電極上,直接測(cè)定抗原與抗體反應(yīng)前后的電位變化。方法較傳統(tǒng)的ELISA和放射性免疫分析(RIA)簡(jiǎn)單、快速,可望作為一種臨床診斷分析的工具。
第六章:利用新型材料金納米空心球,通過(guò)層層修飾的技術(shù),分別將殼聚糖、金納米空心球、鐵蛋白抗體修飾到玻碳電極表面,制備了靈敏度高、壽命長(zhǎng)、可重復(fù)使用的一種新型的鐵蛋白電
9、化學(xué)免疫傳感器。該傳感器對(duì)鐵蛋白檢測(cè)的線性范圍是1.0~ 500 ng·mL-1,檢出限為0.1 ng·mL-1。該電極具有良好的選擇性、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性。該方法與酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法相比較,測(cè)得血清樣品中鐵蛋白含量基本一致。結(jié)果表明,該方法對(duì)實(shí)際樣品中鐵蛋白含量的檢測(cè)是比較快速而準(zhǔn)確的。
第七章:基于納米金及聚酰胺-胺(樹(shù)狀大分子)為載體電位型的前列腺特異性抗原免疫傳感器的研究。在電極敏感膜-PVC膜上,雙層納米金溶膠與聚酰
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