腫瘤相關(guān)抗原OVA66的細(xì)胞生物學(xué)功能研究.pdf

1、本文從以下兩個方面進(jìn)行了研究：1.首先建立OVA66基因高表達(dá)體系，檢測OVA66高表達(dá)對腫瘤細(xì)胞系SMMC-7721和正常細(xì)胞系WISH生物學(xué)功能的影響；2.應(yīng)用RNA干擾的原理和方法，阻斷OVA66基因在高表達(dá)腫瘤細(xì)胞Hela中的表達(dá)后，建立OVA66基因低表達(dá)體系，觀察其對腫瘤細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。 一、高表達(dá)OVA66基因?qū)?xì)胞生物學(xué)功能的作用　　從人睪丸組織中，擴(kuò)增得到OVA66基因，定向克隆于真核表達(dá)載體pcDNA

2、3.1中，重組載體經(jīng)酶切鑒定和測序分析后轉(zhuǎn)染于OVA66基因低表達(dá)的腫瘤細(xì)胞SMMC-7721中，基因轉(zhuǎn)入后經(jīng)過G418篩選，得到穩(wěn)定表達(dá)株。電鏡檢測顯示，轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-OVA66的7721核畸形明顯，常染色質(zhì)增多，胞漿核糖體豐富，表明細(xì)胞增殖代謝增快；細(xì)胞表面突起明顯增多，表明其運(yùn)動能力發(fā)生變化?！　《?、RNAi阻斷OVA66基因表達(dá)對腫瘤細(xì)胞生物學(xué)功能的作用　　本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用RNAi原理，通過構(gòu)建表達(dá)小干擾RNA的載體，特異