CCR1-3-5拮抗劑設(shè)計(jì)、合成及其在A549侵襲轉(zhuǎn)移中作用的研究.pdf

1、研究背景：
　　肺癌是全球最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，占惡性腫瘤死亡的第一位。其中非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）占肺癌總數(shù)的70％至80%。腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)是NSCLC患者死亡的根本原因。趨化因子受體及配體是由小分子分泌蛋白組成的細(xì)胞因子超家族成員，近年來(lái)許多研究發(fā)現(xiàn)CC類趨化因子CCL5與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。
　　CCL5是趨化因子受體CCR1/3/5的共同配體，在體內(nèi)可以與CCR1/3/5受體結(jié)合產(chǎn)生相應(yīng)的生物學(xué)效應(yīng)。MVC是一種

2、CCR5受體拮抗劑，在2007年做為抗HIV-1藥物上市。本課題研究發(fā)現(xiàn)MVC具有抑制A549細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的作用。A549細(xì)胞是NSCLC中較常見(jiàn)一種，具有較強(qiáng)的侵襲轉(zhuǎn)移能力，且可以表達(dá)CCR1/3/5三種受體。我們猜想可以同時(shí)拮抗CCR1/3/5受體的化合物可能具有明顯的抑制腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的作用。
　　目的：
　　探索CCR5受體拮抗劑MVC在A549細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移中的作用。根據(jù)CCR5的三維結(jié)構(gòu)同源模建出CCR1及CCR

3、3的三維結(jié)構(gòu)，使用分子對(duì)接技術(shù)虛擬篩選出一個(gè)CCR1/3/5受體拮抗劑的先導(dǎo)化合物，并對(duì)其進(jìn)行優(yōu)化改造并合成出三個(gè)CCR1/3/5受體拮抗劑。進(jìn)一步研究CCR1/3/5受體拮抗劑對(duì)A549細(xì)胞的細(xì)胞毒性和腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的作用，為NSCLC腫瘤轉(zhuǎn)移防治提供新的思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　1.使用CCK-8法和Transwell法研究受體拮抗劑MVC在A549細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移中的作用；
　　2.根據(jù)CCR5的三維結(jié)構(gòu)使用D

4、iscoveryStudio2.5軟件同源模建出CCR1和CCR3的三維結(jié)構(gòu)；
　　3.運(yùn)用分子對(duì)接技術(shù)虛擬篩選出一個(gè)CCR1/3/5受體拮抗劑先導(dǎo)化合物，并對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)的優(yōu)化改造；
　　4.采用分子動(dòng)力學(xué)模擬三個(gè)CCR1/3/5受體拮抗劑與CCR1/3/5受體的結(jié)合模式；并使用MM-PBSA法計(jì)算其結(jié)合自由能；
　　5.合成三個(gè)CCR1/3/5受體拮抗劑并使用核磁共振氫譜、碳譜、紅外色譜進(jìn)行純度分析及結(jié)構(gòu)鑒定；

5、>　　6.使用CCK-8及Transwell方法研究CCR1/3/5受體拮抗劑對(duì)A549細(xì)胞的細(xì)胞毒性和腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的作用。
　　結(jié)果：
　　1.MVC具有抑制A549細(xì)胞腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的作用；
　　2.同源模建出可靠的CCR1/3受體的三維結(jié)構(gòu)；
　　3.設(shè)計(jì)并合成出三個(gè)CCR1/3/5受體拮抗劑；
　　4.CCR1/3/5受體拮抗劑與CCR1/3/5受體具有穩(wěn)定良好的結(jié)合模式；
　　5.CCR1/3