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1、目的:研究體外傳代培養(yǎng)對(duì)HRPE細(xì)胞的吞噬功能、誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡和細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響。 方法: 倒置相差顯微鏡觀察體外培養(yǎng)HRPE細(xì)胞形態(tài)變化;采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色方法檢測(cè)其角蛋白-18及α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)的表達(dá)變化;應(yīng)用流式細(xì)胞儀技術(shù)測(cè)定不同傳代數(shù)HRPE細(xì)胞Fas的表達(dá)和誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡的差異;應(yīng)用酶標(biāo)儀技術(shù)測(cè)定不同傳代數(shù)HRPE細(xì)胞吞噬色素顆粒的差異。 結(jié)果: HRPE細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)形
2、態(tài)由上皮細(xì)胞特征變化成為間質(zhì)樣細(xì)胞;細(xì)胞角蛋白-18表達(dá)與傳代代數(shù)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.831,P<0.001),α-SMA表達(dá)與傳代代數(shù)呈正相關(guān)(r=0.456,P=0.002);HRPE與淋巴細(xì)胞體外共培養(yǎng)時(shí),HRPE細(xì)胞Fas表達(dá)隨著傳代逐漸減弱,F(xiàn)as表達(dá)與傳代代數(shù)呈負(fù)相關(guān)(陽(yáng)性細(xì)胞率,r=-0.859,P<0.001;平均熒光強(qiáng)度r=-0.880,P<0.001),HRPE細(xì)胞誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡隨著傳代逐漸減弱,淋巴細(xì)胞凋亡率與傳
3、代代數(shù)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.838,P<0.001),共培養(yǎng)時(shí)傳代HRPE細(xì)胞Fas表達(dá)迅速下降,至第3代與第4代間Fas表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),共培養(yǎng)時(shí)傳代HRPE細(xì)胞誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡率迅速下降,至第3代與第4代間淋巴細(xì)胞凋亡率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);HRPE細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)吞噬色素功能逐漸減弱,HRPE細(xì)胞吸光度與傳代代數(shù)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.892,P<0.001);HRPE細(xì)胞傳代時(shí)吞噬色素能力從第3代開(kāi)始迅速
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