3-MA和PDTC聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大鼠急性胰腺炎協(xié)同保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分3-MA對(duì)大鼠急性壞死性胰腺炎肺損傷的保護(hù)作用
　　目的：探討自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine,3-MA）對(duì)大鼠急性壞死性胰腺炎（acute necrotizing pancreatitis,ANP）肺損傷的保護(hù)作用。
　　方法：54只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（SO組，sham operation）（n=18）、ANP組（n=18）、3-MA干預(yù)組（n=18）。采用胰膽管逆行注射5%牛磺膽酸鈉

2、誘導(dǎo)制作大鼠ANP模型，干預(yù)組在造模前腹腔注射3-MA，造模后3h、6h、12h三個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)各組各處死6只大鼠。全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血淀粉酶AMY（Amylzyme），ELISA（Enzyme linked immunsorbent assay）方法測(cè)定IL-1β（Interleukin-1β），HE染色觀察肺、胰腺組織病理變化，運(yùn)用免疫組化檢測(cè)各組大鼠在不同時(shí)間點(diǎn)肺、胰腺組織Beclin-1表達(dá)變化。
　　結(jié)果：ANP組與SO

3、組比較，血淀粉酶AMY、炎癥因子IL-1β隨時(shí)間延長(zhǎng)明顯升高（P＜0.05），肺、胰腺組織病理損傷隨時(shí)間延長(zhǎng)明顯加重，肺、胰腺組織Beclin-1隨時(shí)間延長(zhǎng)表達(dá)明顯升高（P＜0.01）；3-MA干預(yù)組較ANP組 AMY、IL-1β在各時(shí)間點(diǎn)明顯降低（P＜0.01），病理損傷有所減輕，肺組織Beclin-1的表達(dá)在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)表達(dá)明顯降低（P＜0.05），胰腺組織Beclin-1下調(diào)，在12h有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：

4、自噬抑制劑3-MA可能通過PI3K/Akt途徑抑制自噬來減輕急性胰腺炎肺損傷。
　　第二部分3-MA和PDTC聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大鼠急性胰腺炎的協(xié)同保護(hù)作用
　　目的：探討自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤（3-MA）和NF-κB抑制劑吡咯烷二硫氨基甲酸鹽（Pyrrolidinedithicarbamate,PDTC）對(duì)大鼠ANP的協(xié)同保護(hù)作用。
　　方法：90只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（SO組）（n=18）、ANP組（n=18）、3-

5、MA干預(yù)組（n=18）、PDTC干預(yù)組（n=18）及3-MA+PDTC聯(lián)合干預(yù)組（n=18）。ANP組、3-MA組、PDTC組和3-MA+PDTC組均采用胰膽管逆行注射5%?；悄懰徕c誘導(dǎo)制作大鼠ANP模型，并在造模前腹腔注射3-MA或（和）PDTC，造模后3h、6h、12h三個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)各組各處死6只大鼠。全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血淀粉酶，ELISA方法測(cè)定IL-1β，HE染色觀察胰腺組織病理變化，運(yùn)用免疫組化、Western Blot檢測(cè)

6、各組大鼠在不同時(shí)間點(diǎn)胰腺組織Beclin-1和NF-κBp65的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：ANP組血淀粉酶AMY、炎癥因子IL-1β隨時(shí)間延長(zhǎng)明顯升高（P＜0.05），胰腺組織病理損傷隨時(shí)間延長(zhǎng)明顯加重，胰腺組織Beclin-1和NF-κBp65隨時(shí)間延長(zhǎng)表達(dá)明顯升高（P＜0.05）；3-MA干預(yù)組和PDTC干預(yù)組較ANP組AMY、IL-1β在6h、12h降低（P＜0.05），病理損傷有所減輕，胰腺組織Beclin-1和NF-κBp6