腦立輕膠囊對(duì)擬血管性癡呆大鼠空間學(xué)習(xí)記憶影響的研究.pdf

1、血管性癡呆(vascular dementia，VD)系指在各種腦血管疾病基礎(chǔ)上引起的腦組織損害，并產(chǎn)生以高級(jí)神經(jīng)認(rèn)知功能障礙為主的一組臨床綜合征，是老年期癡呆的主要類型之一，臨床主要表現(xiàn)為認(rèn)知功能、社會(huì)生活能力的減退及情感性格的改變等癥狀，學(xué)習(xí)記憶能力受損突出，致殘率高，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，造成了沉重的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)負(fù)擔(dān)?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)該病尚無特效治療手段，長期治療費(fèi)用昂貴。 隨著近年來中醫(yī)藥基礎(chǔ)和臨床研究的深入，中醫(yī)藥在防治VD

2、上日益顯示出優(yōu)勢(shì)。腦立輕膠囊根據(jù)VD多以“腎精虧虛，瘀阻腦脈”為其主要病機(jī)特點(diǎn)，以“補(bǔ)益腎精、化瘀通絡(luò)”為其治則，用肉蓯蓉、山茱萸、三七、銀杏葉、葛根組方而成，在臨床中取得了較好療效。本課題通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法研究腦立輕膠囊對(duì)擬VD大鼠空間學(xué)習(xí)記憶的影響，探討其作用機(jī)制，為臨床用本藥治療VD提供理論依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)研究分為以下三部分： 1.選用清潔級(jí)雄性SD大鼠80只，雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎法(2-VO)建立VD大鼠模型，造模后

3、動(dòng)物隨機(jī)分為腦立輕膠囊高、中，低劑量組和模型組、假手術(shù)組、對(duì)照組，每組10只。對(duì)照組選用尼麥角林作為對(duì)照藥物，動(dòng)物灌胃給藥，治療期30天。 2.治療期結(jié)束后行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，通過定位航行實(shí)驗(yàn)、空間探索實(shí)驗(yàn)、可見平臺(tái)實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)治療后模型大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力，比較各組之間成績的差異。從行為學(xué)上觀察腦立輕膠囊對(duì)擬VD大鼠記憶的影響，探討其治療作用。 3.采用4％多聚甲醛經(jīng)心臟灌注，待鼠尾變硬后取腦，石蠟包埋、切片，H

4、E染色觀察各組大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞形態(tài)變化，計(jì)數(shù)錐體細(xì)胞，比較腦立輕膠囊對(duì)大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞的影響；免疫組化法檢測(cè)各組大鼠海馬CA1區(qū)與記憶關(guān)系密切的酶-膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)和與突觸相關(guān)蛋白-突觸素(Syn)的表達(dá)，比較組間差異，探討腦立輕膠囊對(duì)ChAT和Syn表達(dá)的影響。大鼠經(jīng)2-VO法造模70只，術(shù)后3天死亡19只；假手術(shù)組造模10只，無死亡。實(shí)驗(yàn)期間又陸續(xù)死亡6只。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：造模后各組大鼠的水迷宮成績

5、較假手術(shù)組明顯下降(p＜0.01)，海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞的計(jì)數(shù)及膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)和突觸素(Syn)的表達(dá)與假手術(shù)組比較亦具有顯著性差異(p＜0.01)，說明經(jīng)2-VO法造模后大鼠的行為學(xué)成績、海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞及相關(guān)蛋白明顯下降，證實(shí)造模成功。高劑量組和對(duì)照組的各項(xiàng)結(jié)果相比較無顯著性差異(p>0.05)，高劑量組與模型組及低劑量組結(jié)果相比較具有顯著性差異(p<0.01)，而低劑量組與模型組各項(xiàng)結(jié)果比較改善不明顯(p>0.05

6、)，中劑量組的各項(xiàng)結(jié)果介于高低劑量之間。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明：雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎(2-VO)造成了大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙和腦組織病理形態(tài)以及相關(guān)蛋白的改變，證明模型成功。中藥腦立輕膠囊可以改善擬VD大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力，其機(jī)制可能是：對(duì)低灌注環(huán)境下的大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元具有保護(hù)作用，減輕缺血對(duì)其造成的損傷；抑制缺血后模型大鼠海馬CA1區(qū)ChAT和Syn的降低，提高模型大鼠海馬CA1區(qū)ChAT和Syn表達(dá)，改善膽堿能神經(jīng)元的功能，促進(jìn)