枸杞多糖對大劑量化療后小鼠睪丸生精功能的影響.pdf

1、目前臨床上治療腫瘤和一些免疫系統(tǒng)疾病時,采用大劑量放療或在應(yīng)用大劑量化療藥物時,在機(jī)體“容忍”的劑量下,部分受者睪丸內(nèi)的SSCs破壞嚴(yán)重,甚至殆盡,致非梗阻性無精子癥形成。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展,青春期前腫瘤患者的臨床治愈率已超過70％,但這些腫瘤治愈的患者中有15%需長期面對由化療或放療所引起的不育問題。然而,對于青春期前的淋巴瘤或白血病、精索靜脈曲張以及腮腺源性睪丸炎等生精功能阻滯的非梗阻性無精子癥患者,目前醫(yī)學(xué)尚無有效的治療方法。枸杞

2、多糖(Lyciumbarbarumpolysaccharides,LBP)是枸杞生物活性功能的主要有效成分。近代藥理實(shí)驗(yàn)表明,LBP具有免疫調(diào)節(jié)、抗衰老、降血脂、降血糖、護(hù)肝、防輻射、抗疲勞、保護(hù)生殖系統(tǒng)、抗腫瘤、抗缺氧等功能。在保護(hù)生殖系統(tǒng)方面,有研究表明LBP對生精細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)擬用白消安建立大劑量化療致小鼠不育模型,并給予LBP治療,以c-kit為觀察指標(biāo)檢測其生精功能恢復(fù)情況,研究LBP對大劑量化療后小鼠睪丸c-

3、kit因子表達(dá)的影響,進(jìn)一步探尋因大劑量化療所致不育新的治療方法。
　　目的：探討枸杞多糖(Lyciumbarbarumpolysaccharides,LBP)對大劑量化療后小鼠睪丸生精功能的影響。
　　方法：4~6周齡雄性昆明白(KM)小鼠50只,隨機(jī)分為化療+生理鹽水組(模型組)、化療+50mg/kg·d-1LBP組、化療+100mg/kg·d-1LBP組、化療+200mg/kg·d-1LBP組(即3個治療組)和正常對照

4、組,每組10只。觀察動物的一般狀況,HE染色檢測模型的建立情況,采用免疫組化、實(shí)時熒光定量PCR以及Western-blot免疫印跡法檢測分析LBP對各實(shí)驗(yàn)組小鼠睪丸c-kit因子表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：HE染色發(fā)現(xiàn)造模成功的小鼠生精小管內(nèi)細(xì)胞層數(shù)減少,多數(shù)僅存支持細(xì)胞,管腔呈空泡樣變。免疫組化結(jié)果:c-kit在化療+生理鹽水組與化療+50mg/kg·d-1LBP組中低表達(dá),而在化療+100mg/kg·d-1LBP組、化療+200

5、mg/kg·d-1LBP組及正常對照組中則高表達(dá)。實(shí)時熒光定量PCR檢測結(jié)果:化療+生理鹽水組、化療+50mg/kg·d-1LBP組、化療+100mg/kg·d-1LBP組、化療+200mg/kg·d-1LBP組、正常對照組的c-kitmRNA相對表達(dá)量分別為(5.94±0.11)、(8.58±0.27)、(15.05±0.35)、(15.06±0.21)、(15.27±0.13)。Western-blot免疫印跡法檢測結(jié)果:化療+生理

6、鹽水組、化療+50mg/kg·d-1LBP組、化療+100mg/kg·d-1LBP組、化療+200mg/kg·d-1LBP組、正常對照組的c-kit蛋白相對表達(dá)量分別為(0.48±0.03)、(0.55±0.03)、(1.03±0.06)、(1.08±0.02)、(1.09±0.02)。通過分析發(fā)現(xiàn)模型組(化療+生理鹽水組)較正常對照組c-kit因子的表達(dá)有明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);用LBP治療的三個組較模型組c-ki