三種化學(xué)藥物中有關(guān)物質(zhì)的分析方法研究.pdf

1、存在于藥物中，但其化學(xué)結(jié)構(gòu)與藥物不一樣的任何一種成分，稱為雜質(zhì)，其中與藥物結(jié)構(gòu)類似或具淵源的雜質(zhì)又稱為有關(guān)物質(zhì)。它們的存在嚴(yán)重影響了人們用藥安全和身體健康，甚至?xí)l(fā)影響長遠(yuǎn)的藥害事件。因此，系統(tǒng)研究藥物中存在的雜質(zhì)尤其是有關(guān)物質(zhì)，并嚴(yán)格控制其含量，逐漸在新藥研發(fā)、藥品再評價工作中得到越來越廣泛地重視，但同時由于藥物中其存在量通常為微量甚至痕量，且其結(jié)構(gòu)、來源、變化趨勢均具有不確定性，這給研究者的工作帶來了較大的挑戰(zhàn)。近年來，隨著色譜、

2、光譜技術(shù)的迅速發(fā)展，越來越多的聯(lián)用技術(shù)被運(yùn)用于藥物質(zhì)量控制中，這也為藥物中有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)鑒定、降解途徑、含量測定等方面的研究提供了一種有效的分析手段。
　　 本課題基于現(xiàn)代分析技術(shù)及雜質(zhì)研究的新理念，圍繞藥品中的有關(guān)物質(zhì)，從檢測到的單一有關(guān)物質(zhì)、多個有關(guān)物質(zhì)、全部有關(guān)物質(zhì)三個角度，以硫酸阿米卡星注射液、鹽酸美金剛片、硝苯地平緩釋片為研究對象，對其有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行研究，以體現(xiàn)有關(guān)物質(zhì)在新藥研發(fā)、市場流通中的主流藥品、流通多年的“老藥”

3、三個層面中對藥品質(zhì)量控制的重要意義。
　　 本課題首先建立了檢測鹽酸美金剛片中有關(guān)物質(zhì)的分析方法，探究了其有關(guān)物質(zhì)產(chǎn)生或增長的影響因素，以揭示新藥研發(fā)中有關(guān)物質(zhì)研究的系統(tǒng)性;其次，以硝苯地平緩釋片為例，按雜質(zhì)譜的理念，初步建立國產(chǎn)仿制藥與原研藥品質(zhì)量一致性的評價流程，可促進(jìn)仿制藥質(zhì)量的自我提升、仿制廠家的優(yōu)勝劣汰，推進(jìn)醫(yī)藥市場的良性競爭;最后，增加硫酸阿米卡星注射液中有關(guān)物質(zhì)的檢測項(xiàng)，提升藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，使流通多年藥品滿足現(xiàn)代用藥

4、要求。
　　 第一部分、鹽酸美金剛片的有關(guān)物質(zhì)研究
　　 首先，采用氣相色譜法(GC-FID)對無紫外吸收的3類新藥鹽酸美金剛片中的4種有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行分析方法的建立和優(yōu)化。以Agilent19091Z-213 HP-1(30m×0.32mm，0.25μ m)為色譜柱，經(jīng)過程序升溫，將美金剛主藥峰與4種有關(guān)物質(zhì)A、B、D、E成功分離，使其達(dá)到檢測要求。對氣相方法進(jìn)行方法學(xué)考察，結(jié)果表明:有關(guān)物質(zhì)A、B、D、E在0.1％-2.

5、0％范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好線性關(guān)系，其靈敏度、精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性及準(zhǔn)確度均達(dá)到相關(guān)要求，能作為鹽酸美金剛片中有機(jī)雜質(zhì)的質(zhì)控方法，檢測有關(guān)物質(zhì)的含量。
　　 其次，本文采用超高效液相色譜儀與四極桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜儀聯(lián)用技術(shù)(UHPLC-Q-TOF/MS)考察了美金剛與輔料產(chǎn)生美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的影響因素，建立了高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測法(HPLC-ELSD)檢測其主要產(chǎn)物的方法。以0.05％三氟乙酸-乙腈為流動相，梯度洗脫，流速為1.

6、0ml/min，進(jìn)樣量為25μl;柱溫30℃。蒸發(fā)光散射檢測器漂移管溫度40℃，壓力3.5bar，gain值為7檢測。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，各指標(biāo)均在可接受標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)，方法呈現(xiàn)良好的線性、準(zhǔn)確度、精密度、靈敏度等，可用于美金剛-輔料美拉德主要產(chǎn)物的檢測。
　　 兩種方法互相補(bǔ)充，從不同的角度，共同監(jiān)控鹽酸美金剛片中的有關(guān)物質(zhì)，可系統(tǒng)全面地保障鹽酸美金剛片的安全、有效，質(zhì)量可控。
　　 第二部分、硝苯地平緩釋片雜質(zhì)譜的質(zhì)量一致性評價<

7、br>　　 利用雜質(zhì)譜的理念，將所有雜質(zhì)作為考察對象，建立了仿制藥與原研藥相似度考察的評價流程。以6個國產(chǎn)、1個原研產(chǎn)硝苯地平緩釋片為研究對象，采用中藥指紋圖譜中常用于評價樣品相似度的經(jīng)典化學(xué)計量學(xué)方法，（如:相關(guān)系數(shù)法、夾角余弦法、主成分分析法、系統(tǒng)聚類分層法）經(jīng)過評價方法的選擇、樣品檢測與數(shù)據(jù)采集、批次內(nèi)相似度評價、仿制藥的相似度評價、加權(quán)后的仿制藥相似度評價等程序考察仿制藥仿制水平，結(jié)果顯示采用峰面積為計算矢量的化學(xué)計量學(xué)方法，

8、適用于雜質(zhì)譜的相似度計算;PCA、系統(tǒng)聚類分層能形象地顯示3個廠家仿制較好;加權(quán)后的相似度結(jié)果顯示只有1個廠家仿制較好，進(jìn)一步篩選出仿制廠家的仿制水平。
　　 第三部分、柱前衍生化-HPLC法檢測硫酸阿米卡星注射液中卡那霉素的含量
　　 流通在市場多年的經(jīng)典藥品，也應(yīng)關(guān)注其安全性，不斷提升其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，可以從控制其有關(guān)物質(zhì)入手。本部分實(shí)驗(yàn)，在原有的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上，優(yōu)化了有關(guān)物質(zhì)卡那霉素的檢測方法，擴(kuò)大了檢測樣品的穩(wěn)定性范圍

9、，確保了檢測的準(zhǔn)確性。
　　 本課題的開展和研究成果，從單個有關(guān)物質(zhì)的檢測（硫酸阿米卡星注射液）、多個有關(guān)物質(zhì)的研究（鹽酸美金剛片）到檢測到的全部有關(guān)物質(zhì)的評價（硝苯地平緩釋片），3個層面層層深入，逐步遞進(jìn)，可為藥品的新藥研發(fā)、質(zhì)量評價及質(zhì)量提升提供參考方法和模式;同時從新藥研發(fā)、市場主流藥品到流通多年藥品中有關(guān)物質(zhì)的檢測，近乎涵蓋藥品的整個使用“壽命”，可為藥品研發(fā)與再評價提供方法和奠定基礎(chǔ)，以保證藥品的安全、有效、質(zhì)量可控。